基础研究RSC96.pdfVIP

J South Med Univ, 2017, 37(3): 317-322 doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2017.03.07 ·317 · 基础研究 大鼠大鼠雪旺细胞系雪旺细胞系RSCRSC9696 条件培养液对少突胶质前体细胞的体外条件培养液对少突胶质前体细胞的体外 增殖增殖作用作用 1，2 2 ，3 2 ，3 2 ，3 齐 琦 ，朱安友 ，吕合作 ，胡建国 1 2 3 蚌埠医学院 组织学与胚胎学教研室，组织移植安徽省重点实验室，安徽 蚌埠 233030 ；第一附属医院检验 科，安徽 蚌埠 233004 摘要：目的 观察大鼠雪旺细胞系RSC96 细胞条件培养液（RSC96-CM）对少突胶质前体细胞（OPCs ）增殖的影响，探讨其作 用机制。方法 应用免疫粘附法从胚胎15d 的SD 大鼠脊髓分离OPCs ，应用BrdU 掺入实验检测OPCs 的增殖，应用RT-PCR 技术检测PDGF-AA 和bFGF 在RSC96 细胞的表达，应用ELISA 技术检测RSC96-CM 中PDGF-AA 和bFGF 蛋白的浓度，以 特异性抑制剂阻断观察PDGF-AA 和bFGF 在RSC96-CM 诱导OPCs 增殖中的作用，以特异性抑制剂观察ERK 和JNK 信号 途径在RSC96-CM 诱导OPCs 增殖中的作用。结果 不同浓度的RSC96-CM 培养的OPCs ，其BrdU+细胞的比例与对照组相 比均显著增加（P0.05 ），其中，在含50% RSC96-CM 的培养液中培养的OPCs 的BrdU+细胞的比例达高峰。RT-PCR 证实 RSC96 细胞显著表达PDGF-AA 和bFGF 的mRNAs ，ELISA 结果发现，RSC96-CM 中PDGF-AA 和bFGF 的蛋白浓度分别是 我们前期报道的B 104CM 中PDGF-AA 和bFGF 的蛋白水平的0.87倍和0.92 倍。PDGFR 的特异性抑制剂AG 1295 和bFGFR 特异性抑制剂PD 173074均显著降低RSC96-CM 诱导的OPCs 增殖；此外，Erk 1/2 特异性抑制剂U0126 和JNK 特异性抑制 SP600125 的预孵也显著降低RSC96-CM诱导的BrdU+ OPCs 的比例（P0.01）。结论 RSC96-CM显著诱导OPCs 的增殖，其通 过RSC96分泌的PDGF-AA 和bFGF 激活Erk 1/2 和JNK信号途径而发挥作用；RSC96-CM也可以作为OPCs 常规培养的扩增剂。 关键词：雪旺细胞系RSC96条件培养液；少突胶质前体细胞；增殖 Conditioned medium from rat RSC96 cells promotes proliferation of oligodendrocyte progenitor cells in vitro QI Qi1, 2, ZHU Anyou2, 3, LÜHezuo2, 3, HU Jianguo2, 3 1Department of Histology and Embryology, Bengbu Medical College, Bengbu 233030, China; 2Anhui Key Laboratory of Tissue Transplantation, Bengbu 233030, China; 3 Clinical Laboratory, First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College, Bengbu 233004, China Abstract: Objective To investigate the effect of conditioned medium from rat RSC96 cells (RSC96-CM) on the proliferation of oligodendrocyte progenitor