维生素C注射剂的含量分析课件1.pptVIP

钱莺 沈红霞 杨优 郎旭东 王勇 实验目的 根据含量分析，从自主设计的处方中，选出最佳处方。 维生素C注射液检查 PH值:应为5.0-7.0 颜色:取本品,加水稀释成每1ml中含维生素C50mg的溶液,照紫外可见分光光度法,在420nm的波 长初测定吸光度,不得过0.06. 细菌内毒素:取本品,依法检查,每1mL中含内毒素应小于2.5EU. 装量 装量差异 可见异物 不溶性微粒 无菌 含量分析方法简介 碘量法 2，6-二氯靛酚滴定法 菲林B近红外分光光度法 紫外分光光度法 旋光法 双波长薄层扫描法 *HPLC法 碘量法 实验方法 精密称取注射剂适量，加水50ml稀释至4mg/mL与丙酮2ml,摇匀,放置5min,加稀醋酸4ml与 淀粉指示液1ml,用碘滴定液(0.05mol/L)滴定,至溶液显蓝色并持续30秒不褪色.每1ml碘滴定(0.05mol/L)相当于8.806mg的维生素C。 2，6-二氯靛酚滴定法 实验方法 精密量取注射液适量（约相当于维生素C50mg），置于100mL容量瓶中，加偏磷酸-醋酸试液20mL，用水稀释至刻度，摇匀；精密量取稀释液适量（约相当于维生素C2mg）置50mL锥形瓶中，加加偏磷酸-醋酸试液5mL，用2，6-二氯靛酚滴定液滴定，至溶液现玫瑰红色，并持续5S不褪；另取偏磷酸-醋酸试液5.5mL，加水15mL，用2，6-二氯靛酚滴定液滴定，作空白试验校正。以2，6-二氯靛酚滴定液浓度体积以及相应维生素C滴定度计算。 菲林B近红外分光光度法 实验方法 取两支10 mL具塞比色管，其中一支加入适量的维生素C注射剂(在稀释后浓度小于50 mg／L)，另一支不加；然后分别依次加入2 mL的Folin B试剂，用pH3三氯乙酸溶液稀释至刻度，摇匀，反应5 min后，以试剂空白为参比，使用l cm玻璃吸收池在920 nm波长处测定吸光度A值。平行测量3次，取平均值。 菲林B近红外分光光度法 标准曲线制备 分别准确配制浓度为0-50.0 mg/L的维生素C系列标准工作液，按上述实验方法测定吸光度 。 线性回归做标准曲线。 根据标准曲线求出维生素C含量。 紫外分光光度法 实验方法 在10mL比色管中依次加入pH=9.5醋酸一醋酸钠缓冲溶液2mL，1．06μg/mL甲基紫2mL；在其中一个比色管中加人一定量的维生素C注射液(在稀释后浓度小于50 mg／L)，在另一个比色管中不加维生素C注射液；用二次蒸馏水定容，摇匀。用水作空白，1cm 比色皿于265nm 处，测定吸光度 。 紫外分光光度法 标准曲线制备 分别准确配制浓度为0-50.0 mg/L的维生素C系列标准工作液，按上述实验方法测定吸光度 。 线性回归做标准曲线。 根据标准曲线求出维生素C含量。 旋光法 旋光度与浓度的关系 精密称取105℃ 干燥恒重的维生素C对照品0.4931g，0.7995g，1.0184g，1.2503g，1.5551g，2.0261 g，分别置50mL容量瓶中，用5％碳酸氢钠溶液稀释至刻度， 以5％ 碳酸氢钠溶液为空白，依法测定它们的旋光度， 以旋光度对浓度作线性回归。 旋光法 实验方法 量取维生素C注射液适量，用5％碳酸氢钠溶液将样品稀释成浓度为25 mg/mL，按上述方法进行测定， 每个样品测定3次，代入直线回归方程。计算出含量。 双波长薄层扫描法 实验方法 对照品溶液的制备：取维生素C对照品30mg置10mL容量瓶中，加入95％ 乙醇溶液适量，溶解后用95％乙醇稀释至刻度。 扫描条件的确定：双波长反射法锯齿扫描：λs254nm， λR320nm，SX=3。 线性关系考察:用微量进样器吸取对照品溶液2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 μL点样，展开缸中暗处饱和15分钟，再将点样品的一端浸入展开剂(氯仿一乙醇一冰醋酸一水=54：27：10：5)中展开，展开约10cm，取出薄层板，扫描。以对照品质量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，进行直线回归。 双波长薄层扫描法 样品的含量测定 量取维生素C注射液加入95％乙醇稀释至3mg/mL至刻度，振摇，取续滤液作为供试品溶液。精密吸取供试品溶液4.0 μL ，维生素C对照品溶液3.0 μL ，5.0 μL ，分别点于同一薄层板上，依法展开，扫描，用外标二点法测定样品中维生素C的含量。 HPLC法 色谱条件 色谱柱：6-mm × 150-mm ； 流动相：溶解15.6g磷酸氢二钠和12.2 g 磷酸氢二钾于 2000 mL 水中, 用磷酸调 到 2.5 ±