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(二)化学合成法 是获得定位标记化合物最为准确可靠的方法 不饱和化合物催化加氚 卤化物的催化卤氚置换 金属氚化物的还原反应 1.不饱和化合物催化加氚 RCH＝CH2 RCTH－CTH2 RC≡CH RCT＝CTH RC≡CH RCT2－CT2H RC≡N RCT2－NH2 RR’C＝O RR’CT－OH T2 Tritium HO O O HO N CH2C≡CH CH2C＝CH HO O O HO N 3H 3H 3H2 5%Pd/BaSO4 3H－纳络酮 喹啉二氧六环 HO O O N－CH3 C－OH CH3 C3H7 HO O O N－CH3 C－OH CH3 C3H7 HgO 3H2 Pt / C HO O O N－CH3 C－OH CH3 C3H7 3H 3H 15，16－3H－二氢乙托芬 2.卤化物的催化卤氚置换 RX (ArX) + 3H2 R3H (Ar3H) + 3HX 催化剂 CH2CHCOOH NH2 CH2CHCOOH NH2 2. Br2 CH2CHCOOH NH2 Br Br 3H2 3H 3H 苯丙氨酸 3H-苯丙氨酸 NH2 Br N N O NH2 3H N N O 5-3H-胞嘧啶 1. 3H2 Pd / CaCO3 OH- TOH+X- 3.金属氚化物的还原反应 RCOOH(R) RCH3H－OH RCHO RCH3H－OH RR’C＝O RR’C3H－OH RC≡N RCH23H－NH2 LiAlH33H NaBH4 NaBH33H LiBH4 LiBH33H LiAlH4 LiAlH33H 3H2 (硼氚化钠) (氚化铝锂) HO HO C－CH2NHR O HO HO C－CH2NHR OH 3H NaBH33H 3H－肾上腺素( R=CH3 ) 3H－去甲肾上腺素( R=H ) 严格的定位标记 只还原杂原子的双键 不还原C＝C C≡C ＊ 三．放射性碘标记化合物的制备 √ √ √ ＊ 125I T1/2＝60d 标记物储存应用一段时间、商品化 低能 γ 射线 ，无 β 粒子 辐射分解少，标记物稳定性好 ＊ CONHCH2COOH I CONHCH2COOH 131I + Na131I KIO3 H+ 131I－邻碘马尿酸 (一)同位素交换法: HO I HO 131I Na131I 150℃ 1h 131I－6 －胆固醇 (二) 蛋白质、多肽的碘标记技术: Na125I HO CH2CHCOOH CH2CHCOOH HO 125I + 125I2 NH2 NH2 125I－碘代酪氨酸 氧化剂 ICl，Ch-T，H2O2 标记原理： N HN 125I CH2CHCOOH NH2 125I－碘代组氨酸 N 125I CH2CHCOOH NH2 125I－碘代色氨酸 1. 氯胺T 法： SO2N CH3 Na Cl + 2Na125I + 2H2O SO2NH CH3 + 125I2 + + NaCl 2NaOH 温和氧化剂 ⑴反应液组成： Na125I 74MBq（10μL） 蛋白质 5μg（10μL） 缓 冲液（pH7.4） 30μL 氯胺 T 100μg（10μL） 室温 1~3min ⑵ 加Na2S2O5 200μg（0.2mL)中止反应 ⑶用SephadexG50柱层析分