125客服007猫王王攀张鹤CLIAELISA与TPPA三种方法对梅毒螺旋体特异性抗体检测的意义.docxVIP

CLIA、ELISA与TPPA三种方法对梅毒螺旋体特异性抗体检测的意义【摘要】目的 研究讨论酶联免疫吸附试验ELISA、梅毒螺旋体明胶颗粒凝聚试验TPPA及化学发光法CLIA三种检测方法惊醒梅毒螺旋体特异性抗体检测的临床意义。方法 利用ELISA、TPPA及CLIA三种方法分别检测临床的1198份患者血清样本，将三种方法检测结果呈阳性、但在临床上并未确诊的样本和检测结果不同的样本利用重组免疫印迹法RIBA进行确诊。结果 通过这三种检测方法获得46例可疑及阳性的血清样本，有42例患者的标本三种检测方法均为阳性，其中有34例患者经过临床确诊，另外的8例患者经过三种方法的检测呈阳性，但是没有明确的临床确诊结果,与另外4例检测结果不同的患者标本利用RIBA进行明确诊断。TPPA法确认阳性患者41例，阳性率为3.40%，ELISA方法检测确认阳性患者43例，阳性率为3.60%，CLIA法确认阳性患者44例，阳性率为3.70%；TPPA、ELISA及CLIA三种方法的敏感性分别为91%、97%和98%；特异性结果军事99%，诊断的有效率分别为99.6%、99.7%、99.8%。结论 三种方法中，ELISA和CLIA的敏感性高于TPPA法，在临床中不论是使用三种方法中的哪一种，如果与临床诊断结果不一致，一定要谨慎处理，在需要的时候可以惊醒RIBA进行诊断确认，从而排除假阳性反应。【关键词】CLIA；ELISA ；TPPA ；梅毒螺旋体；特异性抗体检测梅毒疾病是由于人体内的梅毒螺旋体发生病变而引起的一种慢性类性疾病，这种疾病通畅可以侵犯人体全身的每个器官，从而产生多种症状及体征，在近几年此种疾病呈现逐年上升的趋势。所以对于梅毒疾病的确诊以及治疗在临床上是非常重要的。临床上对于检测梅毒螺旋体感染的方法主要是进行梅毒螺旋体明胶颗粒凝聚试验TPPA和酶联免疫吸附试验ELISA，目前国内新开发出的检测方法是化学发光法CLIA，这种检测方法没有污染携带现象，检测的精密度较好，结果的灵敏度和特异性结果都非常的高，检测仪器的自动化程度较高，非常值得在临床上推广。本文主要讨论三种方法在临床上对于梅毒螺旋体抗体的检测灵敏度，并对其进行分析比较，现将本次研究结果报告如下。1资料与方法选取我院自2013年1月—2014年11月我院收治的1198例临床患者，其中男性624例，女性576例，年龄区间为18—56岁，平均年龄31.2岁。患者在性别及年龄等方面没有差异，对结果不会产生影响。1.1方法对所有患者抽血并在4h内进行血清分离，在4°C保存，在第二天进行ELISA及CLIA检测，对两种检测的阳性结果进行TPPA检测，将所有阳性及可疑样本保存与-20°C，利用WB方法进行确认。ELISA通过ELISA方法对获得的血清样本进行梅毒螺旋体抗体检测，将表达梅毒矿院与血清中的抗TP抗体进行反应，向反应中添加HRP标记的基因工程重组梅毒抗原，并显色，对结果利用酶免仪判断，阳性S/CO≥1，阴性S/CO1。1.1.2CLIA法采用TP抗原制成固体抗原，将TP抗原进行HRP标记，使标本中的梅毒螺旋体抗体与标记的TP抗原形成双抗原，洗涤，加化学发光底物，测其化学发光之，根据获得的数据判断是否含有特异性抗体，阳性S/CO≥1，阴性S/CO1。TPPA法将经过超声裂解得到的纯化梅毒螺旋体菌株作为为抗原，并使其包被与明胶粒子上，将包被获得的样本与血清样本中的特异性抗体箱结合，观察其凝集反应。RIBA发将样本中的特异性IgG抗体与通过电泳获得的梅毒螺旋体的抗原相结合，进行温育后，利用显色反应判断结果的阳性、可疑或阴性结果。阳性为出现2条或者2条以上的特异性目标条带，可疑为1条特异性条带，阴性为无特异性条带。1.2统计学分析对三种检测方法的进行阳性结果统计，并计算三种方法的阳性率，利用DPSS17.0软件进行统计学分析，并对结果进行X2检验，以p0.05具有统计学意义，有显著性差异。2结果通过这三种检测方法获得46例可疑及阳性的血清样本，有42例患者的标本三种检测方法均为阳性，其中有34例患者经过临床确诊，另外的8例患者经过三种方法的检测呈阳性，但是没有明确的临床确诊结果和4例检测结果不同的患者标本利用RIBA进行明确诊断。TPPA法确认阳性患者41例，阳性率为3.40%，ELISA方法检测确认阳性患者43例，阳性率为3.60%，CLIA法确认阳性患者44例，阳性率为3.70%；TPPA、ELISA及CLIA三种方法的敏感性分别为91%、97%和98%，ELISA及CLIA的敏感性均要高于TPPA发，具有统计学意义（p0.05）；特异性结果均为99%，诊断的有效率分别为99.6%、99.7%、99.8%，进行统计学分析，无显著差异（p0.05）。具体数据见表1。表1 三种检测方法的