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FCM检测数据的显示与分析 FCM所测试的参量是一组数据，数据显示方式，通常有一维显示，二维显示和三维显示（又称假三维显示）。 ●FCM数据显示与分析 1.单参数直方图（Histogram） 2.双参数数据显示： 二维点图(Dot Plot) 等高线图(Contour Plot) 二维密度图(Density Plot) 假三维图(Pseudo 3D Plot) 3.三维图(3D Plot) A DNA histogram A typical DNA Histogram 实体瘤DNA倍体分析常见组方图 正常人淋巴细胞染色体分布组方图 Burkitt’s淋巴瘤细胞系核型组方图 化疗药物处理后－凋亡峰 疟原虫DNA分布组方图 等高图和密度图 三维图 ●基本应用软件：Cellquest、FACSComp 全自动获取分析软件 1）SimulSET / MultiSET：淋巴细胞亚群计数，含量及绝对计 数分析 2）ProCOUNT：干细胞计数分析，报告CD34+细胞绝对值 3）HLA-B27：自动测定全血HLA-B27 4）Retic-COUNT：网织红细胞计数 自动分析软件 1）ModFit：DNA周期、细胞倍体性和调亡分析 2）QuantiCALC：荧光定量分析，报告每个细胞抗体结合量（ABC），主要检测白细胞表面分化抗原和细胞活化指标 3）PAINT-A-GATE：多参数资料分析，同时分辨显示多个细胞群体 4）Attractor：多参数资料的快速批量分析 * * 张林西 河北北方学院 生命科学研究中心 随荧光测量通常的数据采集方式有两种： 1. 数据线性（LINEAR）采集方式：这是荧光测量通常使用的方式，即放大器的输出和输入是线性（2；4；8；16…）关系，输入信号放大几倍，输出信号也放大几倍，线性采集方式常适用于信号强度变化较小，代表生物学线性特征的信号（如DNA含量）。FSC也常用线性放大测量。 2. 对数（LOG）采集方式：对数方式是免疫学定量分析常用的数据采集方式，主要是为了使荧光标记较小群体的细胞能与标记较大群体细胞同时显示出来。 DNA直方图1 G0-G1 S G2-M Fluorescence Intensity Cell Number G0-G1 S G2-M Fluorescence Intensity # of Events DNA直方图2 DNA直方图3 Dot Plot 二维点图 Contour Plot Density Plot Pseudo 3D Plot 3D Plot FCM数据分析 1. DNA含量的定量分析 DNA含量以DNA指数（DNA Index，DI)来表示，公式为 实验样品细胞G0/G1峰的均道值 DI= ——————————————— 正常细胞G0/G1峰的均道值 2. RNA含量的定量分析 RNA含量=256道 [最高细胞数（256 道– 平均道数）÷平均道数]×（10-2） 平均RNA指数（RNA Index,RI) = 实验细胞平均道数 ÷正常细胞平均道数 * *