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实验九 肝中酮体的生成

糖尿病患者尿酮体的自我监测 酮体粉可用于尿酮体的自我检测。 糖尿病人尿中出现酮体时,一般需要到医院就诊,在医生的指导下进行治疗和处理: 首先,补充一定量的额外胰岛素 然后,需要大量饮水,饮水一方面补充人体内缺乏的水分,另一方面可以加快酮体等有害物质的排泄。 对于症状严重需住院治疗,防止酮症酸中毒的发生。 一、目的 1 了解肝中酮体生成实验的原理。 2 验证酮体生成是肝脏特有的功能。 二、原理 丁酸作为底物,分别与肝匀浆和肌匀浆保温。 肝细胞中含有酮体生成酶系,能将丁酸代谢生成酮体,酮体中的乙酰乙酸、丙酮可与显色粉中的亚硝基铁氰化钠作用,生成紫红色化合物。 肌肉中没有生成酮体的酶系,同样处理的肌匀浆无法代谢丁酸生成酮体,因此不能与显色粉产生颜色反应。 三、器材 新鲜猪肝、新鲜猪肉、匀浆机、剪刀、 恒温水浴箱、 白瓷反应板、试管、滴管、试管架 四、试剂 1)0.9%氯化钠溶液 2)罗氏溶液 3) 0.5mol/L丁酸溶液 4) 0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.6) 5) 显色粉 五、操作 肝匀浆和肌匀浆的制备 取等量猪肝和肌肉组织,剪碎,分别放入匀浆器中,加入生理盐水(重量:体积为1:3),制成匀浆。 取4支试管,编号后按下表操作: 取4支试管,编号后按下表操作: 4支试管摇匀 37℃恒温水浴中保温50分钟 分别于各管取离心液滴于有凹白瓷反应板中 每凹放入显色粉一小匙(约0.1g) 观察并记录每凹所产生的颜色反应 六、结果及分析 观察记录各管颜色变化 分析酮体生成的部位及生理意义 七、思考题 酮体代谢有何生理意义? 糖尿病酮症酸中毒的生化机制? 如何设计实验验证肝外用酮? 底物丁酸气味难闻,考虑以何种底物替代之?设计实验验证你的想法。 * *

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