仪器分析+04+紫外、可见分光光度法.ppt.ppt

双光束分光光度计是自动比较了透过参比溶液和样品溶液的光的强度，它不受光源（电源）变化的影响。 双光束分光光度计还能进行波长扫描，并自动记录下各波长下的吸光度，很快就可得到试液的吸收光谱。所以能用于定性分析。 （三）双光束双波长分光光度计： 三、分光光度计的校正 通常在实验室工作中，验收新仪器或实验室使用过一段时间后都要进行波长校正和吸光度校正。 建议采用下述的较为简便和实用的方法来进行校正：镨铷玻璃或钬玻璃都有若干特征的吸收峰，可用来校正分光光度计的波长标尺，前者用于可见光区，后者则对紫外和可见光区都适用。也可用K2CrO4标准溶液来校正吸光度标度。 第五节 显色反应及其影响因素 一．显色反应和显色剂： （一）显色反应： 在光度分析中将试样中的待测组分转变成有色化合物的反应叫显色反应。 显色反应一般分为两大类：一类是配位反应；另一类是氧化还原反应。 Fe3＋＋SCN－=FeSCN－； Mn2＋－5e＋4H2O= MnO4－＋8H＋ 在这两类反应中，用得较多的是配位反应。 （二）显色剂：与待测组分生成有色化合物的试剂叫显色剂； 1．无机显色剂： 2．有机显色剂： 1）优点： a．具有鲜明的颜色，ε都很大（一般可达到104以上），所以测定的灵敏度很高； b．生成的一般为螯合物，稳定性很好，一般离解常数都很小； c．选择性好 d．有些有色配合物易溶于有机溶剂，可进行萃取光度分析，提高了测定的灵敏度和选择性。 3．常见的有机显色剂： 1．磺基水杨酸： 其结构式如下： 它可用于测定 三价铁离子。 2．邻二氮菲（邻菲罗啉， 1，10—二氮菲）：结构式为： 直接在PH=3～9时与Fe2+生成红色螯合物。用于铁的测定。 3．双硫腙：也叫二苯—硫腙 结构式为： 测定很多重金属离子，如：铅、锌、铜、银、汞、镉等。 4．偶氮胂Ⅲ（铀试剂Ⅲ）：可用于测定铀、钍、锆等。其结构式为： ? 二．选择显色反应的标准： 1．选择性要好： 2．灵敏度要高： 3．有色化合物的组成要恒定，化学性质稳定。 4．显色剂的颜色与有色化合物的颜色差别要大 5．反应的条件要易于控制。 三．影响显色反应的因素： （一）显色剂用量： 显色反应就是将待测组分转变成有色化合物的反应，其反应一般可用下式代表： M＋R = MR 反应具有一定的可逆性，当加入R的用量时，有利于反应向右进行。 但要注意，加入的显色剂用量也不能太多，否则产生副反应，对测定产生不利。例如：用SCN-与Fe3+反应生成红色配合物测定铁时，当加入的显色剂太多时，就会对测定产生不利。 对于不同的情况，显色剂的用量对显色反应的影响是不同的。在实际选用时，一般是通过实验来确定的。 实验的方法为：固定待测组分的浓度和其它条件，分别加入不同量的显色剂，分别测定它们的吸光度，以吸光度为纵坐标，显色剂用量为横坐标作图，可得到吸光度—显色剂用量的曲线，其结果分为三种情况： （二）溶液酸度： 酸度对显色反应的影响很大，因为溶液酸度直接影响着金属离子、显色剂的存在形式和有色化合物的组成、稳定性等。 1．酸度对金属离子存在形式的影响：很多高价金属离子都要水解，酸度较低时，不利于显色反应的进行。 2．酸度对显色剂浓度的影响： 很多显色剂都是有机弱酸，在溶液中有如下平衡： HR H+＋ R－ 而显色反应为 M＋R MR 所以酸度太高对反应不利。 3．酸度对显色剂颜色的影响： 很多显色剂本身就是酸碱指示剂，酸度不同时，它们的颜色不同。如果控制不好酸度，就会使指示剂颜色与有色化合物的颜色相近而影响测定。 比如：用二甲酚橙为显色剂，它与金属离子形成的配合物为红色，它本身在PH6.3时为柠檬黄色，而在PH＞6.3时为红紫色。所以在PH＞6.3时，就无法进行测定。 4．酸度对配合物组成的影响： 有些显色反应当酸度不同时，要生成配位比不同的配合物，其颜色也有所不同。如：Fe3+与水扬酸的配合物： PH＜4 Fe(C7H4O3)+ 紫色 4＜PH＜9 Fe(C7H4O3) 2－ 红色 PH＞9 Fe(C7H4O3) 33－ 黄色 由上可见，酸度对显色反应的影响是很大的，适宜的酸度要由实验来确定。 （三）显色时间： 显色反应的速度有快有慢，快的几乎是瞬间完成，颜色很快达到稳定状态，并且能保持较长时间。大多数显色反应的速度是比较慢的，需要一定时间才能达到稳定。而且有些有色化合物放置过久也会褪色。 适宜的显色时间要由实验来确定。 （四）温度： 一般显色反应在室温下进行，但是也有一些反应要加热到一定温度下才能进行。而且还有一些有色配合物在室温下要分解。 （五）溶剂的影响： 1．影响有色化合物的溶解度； 2．影响有色化合物的颜色； 3．影响