生物体液差异蛋白质组学研究技术体系的建立.pdfVIP

第 43 潜第5 期 2刷年5 月 山东大学学报(理学版) Vol.43 No.5 Journal of Shandong University( Natural Science) May2α)8 文章编号:1671拥52( 2lm)05-X脂榈 生物体液差异蛋白质组学研究技术体系的建立 秦兆宇l ，张小葵1 ，何峰1 ，刘师莲2 僻 (1.山东大学威海分校海洋学院，山东威海部4209; 2. 山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所，山东济南药ω12) 摘要:为探讨以 2D-DIGE 为核心的生物体波差异蛋白质组学技术体系，取2 组不同生物学状态下的体液样本进行 研究。每组包含一例人类多发性硬化样本和一例对照样本，共设3 组平行实验。经冷丙嗣沉淀法除盐提取蛋白并 精确定量，分别用分 CY5 和 CY2 荧光染料按最小标记法对多2良性硬化样本和对照组进行标记。另J夺取混合蛋白 内用 CY3 标记。混合样品后分别在3 块2D-gel 上进行也泳，通过Typh∞m 倒ω 多功能焚光扫描仪及胁Cyder2心运 并分析软件进行 DIG应分析。差异蛋白用 MAIDI-1DF/fOF 进行鉴定，将所得结果承入 M伽rcore 计算平台，进行蛋 白质相关分析。结采农明，利用该方法研究不同生物学状态下的体液标本，结合网络图增分析，可得到较多有意 义的候选蛋白信息。 关键词:生物体液;差异蛋白质组学;双向荧光1.异凝胶也泳;M伽仰陀 中朋分类号:Q785 文献标志码:A The establishment of a technique system for differential proteomics of body f1uids QIN zl旧。_ýul ， ZHANG Xiao-kui 1, f配 Fe时， UU Shi-liall* ( 1. Biology Science De阳tment in M血ne College , Shan(扣ng University at Weihai , Weihai 264209 , Shandor哩， China; 2. Institute of Biochernislry and Molecular Biology , Schω，1 of Medícine , Shandong University , Jinan 2筑Xl12， shando鸣， Clúna) AbI世act: In oroer 10 回tahlish a teclmique system for 耐erential proteomics of 蚊Kfy f1uids , cerebl06pinal f1山d 皿npl创 in 阳。 different physiological states were studied. There ~幽 a Multile Sclerosis 凶mple and aωntrol forωch 阱up，讲úch w:ωdone in 创plicate. 也mpJ创 we陀 precipitated 明白 ice-ωld acetone and 由e proteinωncentratÍon was 刷刷优ly qt础nti1ied. Theωntrol and abnormal 伊ur田 were labeled with two different Cyanine Dy棚 (Cy2 and Cy5) using 即 núnimal labe1ing rnethod 州ùle 阳 internal 幽且也时 group was labeled with