蜂房哈夫尼菌植酸酶基因appA的克隆、表达及酶学性质研究.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’() *! +( *# 年 月 !$$% !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 +(,-./-0 !$$% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 蜂房哈夫尼菌植酸酶基因!# 的克隆、表达及酶学性质研究 ， !# $%#’#( )*+,--’# .#/ $0.,.12,’3.2’# 4 . 56% 7082.- 4,9 $!% ’! !()*’ 谷维娜，黄火清，杨培龙，罗会颖，孟 昆，王亚茹，姚 斌 ， ， ， ， ， RS T-3E+6 DS8+R D?(EU3BA V8+R G-3EW(BA WSX D?3EV3BA 5O+R Y?B T8+R V6E1? 6B4 V8X Z3B 中国农业科学院饲料研究所，北京 $$$I ， ， ， 3%%4 5%%+*0 6$/#/)/% !#$%% 70+4%82 (- 71*#0),/)*+, 90#%$0% .%#: #$1 $$$I !#$+ 摘 要 从蜂房哈夫尼菌（ ）中克隆获得一个植酸酶编码基因 ，该基因全长 ，编码 个氨基酸，其中前 ;+- $#+ +,%# +==7 L/9 [[[ 个氨基酸为信号肽，成熟蛋白的理论分子量为 。将基因 克隆到大肠杆菌 表达载体 （ ），并在大 [L Q!F +==7 * 0(,# 9O;E!!/ J 肠杆菌中表达，表达产物具有植酸酶活性。对表达的酶蛋白进行纯化，并初步研究了该酶的酶学性质，结果表明：酶的作用最 适 值为 ；在 范围内，酶活性保留 以上；酶的作用最适温度为 ；酶的比活性为 ，酶动力 9D [ QL 9D ! Q$ \ $ Q$ I$ ] #$^ L# Q%S_.A 学分析表明其 为 ， 为 ；该酶对胰蛋白酶和胃蛋白酶有一定的抗性。该研究为哈夫尼菌属来源植酸 ?. $ Q[K..()_ W @.6N !IS_.A 酶的首次报道。 关键词 植酸酶，基因表达，纯化，酶学性质 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） ULL 8 $$$E$# !$$% $#E$%E$L :;-2,.12 8 A-B- +==7 -B2(43BA 6 B(,-) 97@:6- =6 C30:)@ 2)(B-4 C0(. ;+- $#+ +,%# /@ GH1 6B4 -‘?-B2-4 * ;7- A-B- =6 ， 2(B3:-4 (C L /9 -B2(43BA [[[ 6.3B( 6234 * ;7- 26)2?)6:-4 .()-2?)60 =-3A7: (C :7- .6:?0- 8GG8 =6 6/(?: [L Q! F *