药物安全性评价-5.局部给药毒性试验.pptVIP

黑龙江中医药大学药物安全性评价中心 教研室：医学实验动物学 姓 名：于 敏 联系方式第六章 药物安全性评价中局部给药毒性试验 局部用药的毒性实验主要是依据局部用药部位的解剖和生理特点设计的。最常用的局部用药制剂有皮肤用药制剂（涂剂、擦剂、膏药剂、透皮吸收制剂等）、滴眼剂、滴鼻剂和喷雾剂、肌内注射剂、直肠和阴道用药制剂等等 第一节 皮肤给药毒性实验 一.皮肤组织结构 皮肤覆盖于整个体 表组织，由表皮和真皮组成。 二.化学物质对皮肤毒性作用的类型 二、皮肤用药毒性实验 （一）皮肤用药急性毒性实验 1.定义： 是指动物完整或破损皮肤一次性接触受试物后在短期内出现的毒性反应实验。 2.受试物：应使用临床制剂，剂量用mg/kg、g/kg或、mg/m2、g/m2表示。如临床制剂浓度无法满足毒性实验的剂量要求，应根据临床制剂的制备标准制备高浓度制剂用于本研究。如果受试物为粉末状，则应用适宜的基质（如凡士林、羊毛脂等）溶解混匀。 3.实验动物及实验条件 4.剂量设计 至少应设三个剂量组，剂量设计应足以反映受试物的剂量－毒性效应关系，可根据药效剂量及预实验结果确定组间距，一般为0.65～0.85。另设赋形剂对照组，必要时设空白对照组。如果受试物在拟用临床给药时有可能与破损皮肤接触，则应另设破损皮肤组。 7.结果评价 对观察到的阳性症状结合大体解剖或病理组织学结果进行综合分析，与对照组比较，对动物的毒性反应及死亡原因作出明确判断。 8.实验操作 首次给药前24h对给药区（通常在背部）进行脱毛处理（可剪、剃或用适宜的脱毛剂）。每天给药一次，每次至少接触6h。应保证受试物与给药部位具有良好接触并避免动物食入药物。可用纱布等无刺激性辅料包裹或给动物穿上特制的通透性好的外套。 9.观察指标 除增加给药部位皮肤及其周围组织乃至全身皮肤变化和皮肤病理学检查外，其余指标与长期毒性实验要求一样。 10.结果评价 全身毒性反应的结果评价与长毒实验要求一样，应根据各检测指标及病理组织学检查结果综合分析。除此以外还应注意评价给药局部及其周围组织的毒性反应。 （三）皮肤刺激性实验 1.定义 皮肤刺激性：指经皮肤给药后，在皮肤上产生的可逆性炎性病变。若给药部位产生了不可逆性的组织损伤则称为腐蚀性。皮肤刺激性实验是观察动物的皮肤接触受试物后是否引起红肿、充血、渗出等局部反应。 2.受试物 应采用与临床应用制剂一致，符合临床用质量标准规定的受试物进行实验，同时注明其名称、来源、批号、含量（或规格）、赋形剂、保存条件及配制方法等，其中赋形剂和杂质等的名称和量应尽可能明确，并附有研制单位的自检报告。所用赋形剂应该标明批号、规格和生产厂家，并符合实验要求。 3.实验动物及实验条件 多种哺乳动物可以选择，一般首选白色家兔，每组动物数4～8只，雌、雄各半。也可以选用其他种属的动物（如小型猪等），选择家兔和小型猪以外的动物应阐明合理性。 * * 根据性质不同，由药物引起的皮肤损害包括原发性刺激炎症反应和致敏反应，偶然也可引起皮肤癌。 （一）皮肤原发性刺激 原发性刺激：是指药物直接作用于皮肤引起的病理性反应。只要皮肤接触药物达到一定浓度和时间都有可能产生这种反应。它与皮肤变态反应的不同之处在于初次接触即可发生。 原发性刺激的作用机理可因药物理化性质的不同而不同。可使皮肤角质蛋白溶解出现溶解性坏死（强碱）；可溶解皮脂表面的脂性薄膜，产生脱屑和皲裂（脂溶性溶剂）；皮肤发生溃疡（铬酸盐）；使皮肤蛋白质变性（银、汞、砷等金属盐）。 （二）皮肤致敏 皮肤致敏为变态反应，包括药物致敏和光敏反应。其病理变化特征为不易找到一般毒理学的量―效规律；接触后经一定潜伏期，再次接触该药物才能激发出特定症状。 局部用药可导致皮肤致敏反应的药物有抗生素、局麻药、消毒药、某些化妆品等。 （三）皮肤致癌 主要为多环芳烃类和无机砷。 每组动物数：家兔、小型猪4～6只,大鼠或豚鼠10只，雌雄各半 动物体重：家兔2～3kg，豚鼠200～300g，大鼠200～250g，小型猪30～40kg。 饮食、摄水：自由饮食、摄水，饲料应为适合所选动物的全价颗粒营养饲料，并注明饲料生产商、批号； 动物房温湿度：家兔、豚鼠及小型猪应控制在18～26℃，相对湿度为40%～70%；大鼠应控制在20～25℃，相对湿度为40%～70%。换气次数应为10～20