用环介导等温扩增技术快速检测粪便样本中的沙门菌.pdfVIP

? 技 术 通 讯 ? ????????????????????????????·．????。?．???????．??????·? ???? ???：??．?????．????．????—????．????．??．???? 研究报告? 用环介导等温 扩增 技术快 速检测粪便样本 中的沙 门菌? 刘 威 ，李环 ，邹 大 阳 ，杨 展 ，赵 向娜 ，李 雪莲 ，崔茜 ，王 思淼 ，? 黄 思妹 ，闫夏 贝 ，魏 晓 ，王 雪松 ，尹 志涛 ，黄 留玉 ，袁 静? 军事 医学科 学院 疾病预防控制所 ，北京 ??????? ?摘 要? 目的 ：建立快速检 测粪便样本 中的沙 门菌 的环介 导等温扩增技术??????，并着重在灵敏度和特 异性方面对? 此方法进行评价 。方 法 ：利用 ????针对沙 门菌特定基 因?????靶 基因?设计 的?条特异 引物 ，通过 引物特异性识别特? 定基 因??鼽?上 的?个独立 区域来 快速检 测沙 门菌 ；????反应过程 中会产生 白色沉淀焦磷酸镁 ，故可以通过 监测浊度? 来判定反应 结果。结果 ：实 时浊度仪 监测反应 结果 表 明，????反应在 ??～??℃等温条件下 ??????内完成 ；如果在反? 应前 添加羟 基萘 酚 兰，蓝色 阳性结 果很 明显 区别于 紫色 阴性结果 ；????的最低检 出限为?．?????／??，???为??．?? ??／??，????方法 的检 测灵敏度是 ???的 ??倍 ，且具有 良好 的特异性 。结论 ：????方 法用 于快速检 测沙 门菌 ，具有? 检测过程 简单、实验装 置简便 、反应结果 肉眼可辨 、灵敏度高、特 异性强 的特 点，对非沙 门菌 菌株 的结果呈 阴性 ，表 明? 引物设计有很好 的特 异性。对粪便样本进行检 测，发现具有 同样 的