油茶3羟酰CoA脱水酶基因的克隆与表达分析 (1).pdfVIP

????? 植物生理学报 ???????????????????????????，??????：?????????? ???：??．??????．????．???．????．????? 油茶?羟酰???脱水酶基因的克隆与表达分析? 王建勇?，谭晓风?，曾艳玲?，龙洪旭?，陈鸿鹏?，刘凯? 中南林业科技大学，经济林培育与保护教育部重点实验室，经济林育种与栽培 国家林业局重 点实验室，长沙??????；?国家? 林业局桉树研究开发中心，??? ??????；?广西林业科学研 究院，南宁??????? 摘要：?羟酰????：?水酶是一类催化?羟酰???脱水转化成为烯酰???形式的酶。本研究以国审油茶品种‘华硕’种子为材料，? 在已构建的转录组和表达谱数据库的基础之上，采用????技术，克隆到一个油茶?羟酰???脱水酶基因的????全长，命名? 为??????????????录号??????????该基因????全长为????????，含有??????的开放读码框，编码???个氨基酸，分子量? 为??．?????，理论等电点??为?．?，疏水残基 占整个氨基酸残基的??．?％，是亲帕陛蛋白，具有?个比较明显的跨膜区和蛋白质? 酪氨 酸磷 酸酶基 序“?????????”。在基 因????全长序列 的基础 上，分别成 功地构 建 了原核表达载体 、超表 达载体和? ???干扰载体，其 中，原核表 达载体在宿主 细胞?????????上成功诱导表 达，获得表观 分子量约为??????的相应 目的蛋 白。? 实时荧光定量???分析表明，在?个不同发育时期的油茶种子中?????高效表达主要集中在?～????，转录最高峰发生在?? 月，其表达量在种子发育过程中呈增加趋势。? 关键词：油茶；?羟酰???脱水酶；克 隆；表达分析? ???????????????????????????????????????????????????????????????????????? ??????????????????????? ?????????—?????，??????????????’，????????—?????，?????????—???，???????????????，???????? ???????????????????????????????????????????????．????????????????，????????????—?????????????????????????????????? ????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????—? ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????，?????? ????????：?一???????????．????????????????????????????????????????????????????????????????????????????．??—? ?????????．???????????????—???．?????????????’??????一????????????????一???????????．?????????????????????—? ??????????????‘???????’????????????????????????????????????????????????????????．??