高速逆流色谱-原理及应用.pptVIP

;高速逆流色谱技术及应用领域 　　　　　　 晋晓峰 研发部副主管 　　　　　　　　　　　上海同田生物技术有限公司;报告内容 ;一、高速逆流色谱原理; 液－液分配色谱 利用一种特殊的流体动力学现象使互不混溶的两相溶剂(固定相和流动相)在螺旋管中高效地接触、混合、分配和传递 其中固定相以一种相对均匀的方式分布在一根聚四氟乙烯管绕成的螺旋管中 流动相以一定的速度通过固定相，并按照被分离物质分配系数的不同依次洗脱而获得分离;固定相的保留 利用螺旋管的方向性和同步行星式运动产生的二维 离心力场形成的单向性流体动力学平衡（HDES） 从而实现流动相高速移动时固定相的保留;混合区：在靠近离心轴心大约有四分之一的区域，两相的激烈混合 静置区：两相溶剂分成两层，重相在外部，轻相在内部;K ＝ Cs/Cm ;HSCCC的工作流程;二、高速逆流色谱优点;不用固态载体的高效液-液分配色谱技术 不存在样品的不可逆吸附，理论回收率100% 样品负载能力强，制备量大，重现性好 操作成本低，无制备柱消耗，后续投入较低 可采用广泛的溶剂体系和多样性的操作条件 操作简单，无需太多样品前处理 ;三、高速逆流色谱应用;高速逆流色谱技术的应用领域;高速逆流色谱 在中药现代化中的应用;实例1 大黄有效成分的分离;实例2 蛇床子有效成分的分离;Journal of Chromatography A,1102(2006)44-50;实例4 吴茱萸生物碱的分离;芦荟苷B;丹参提取物的HSCCC分离图谱;沙棘提取物的HSCCC图谱;;小结： HSCCC在中药中各类单体的制备均有应用，经 过简单的前处理（提取、萃取或大孔树脂柱）后 直接上样，一次分离就能得到高纯度和高得率的 单体，已成为天然产物分离纯化中有效的不可替 代的分离方法。;HSCCC在中药指纹图谱中的应用;B1;溶剂体系：石油醚-丙酮-水（3:3:2,v/v）样品：250mg 环孢菌素粗品检测条件：ELSD;溶剂体系：正己烷-乙酸乙酯-甲醇-0.5％氨水（3:7:5:6,V/V）， 检测器：ELSD；进样量：300mg ; 实例1 藤黄酸异构体的分离;实例1 利用HSCCC分离标准蛋白质混合物;溶剂体系：PEG1000-磷酸二氢钾-水＝15-17-68(%,w/w)样品：1mg 细胞色素C、8mg 肌红蛋白、20mg??菌酶; 从上面这些实例可以看出，HSCCC作为一种高效的液液分配色谱，拥有广阔的应用空间。;