雌二醇检测标准操作流程.docVIP

概述 雌激素能促使女性的第二性征发育。它与促孕激素（孕酮）协同调控女性的生殖过程。具有生物学活性的雌激素是17β-雌二醇，是一种分子量约为272道尔顿的甾类激素。雌激素主要在卵巢（卵泡、黄体）中生成，睾丸和肾上腺皮质也会生成少量的雌激素。妊娠期间，雌激素主要生成于胎盘。约98%的雌二醇是与转运蛋白（SHBG：性激素结合球蛋白）结合运转。在月经周期中，雌激素的分泌分为两个阶段。检测雌二醇主要用于临床诊疗下丘脑-垂体-性腺轴功能紊乱性疾病、男性乳房增生症、分泌雌激素的卵巢/睾丸肿瘤以及肾上腺皮质增生症。此外尚可应用于不孕不育的治疗和判定体外授精（IVF）的排卵时间。Elecsys雌二醇检测法是采用特异性针对17β-雌二醇的多克隆抗体的竞争法实验原理。甲二氢睾酮促使内源性雌二醇从样本中释放与钌复合物a标记的雌二醇衍生物竞争生物素抗体的结合位点。 1 目的 规范雌二醇检测测试，确保检测结果准确性和重复性。 2 检测方法和原理 2.1检测方法：竞争法 2.2检测原理：使用释放剂，将样本中包含的内源性雌二醇从其结合蛋白释放出来。然后，添加吖啶酯标记的抗雌二醇单克隆抗体，与可用的雌二醇结合。最后，向反应物中添加雌二醇衍生物捕捉固相，与雌二醇竞争和吖啶标记抗体结合。洗涤后，添加酸和碱，以启动化学发光反应。 3 标本采集与保护 新鲜无溶血血清 遵守以下推荐的血清标本处理，运行和储存步骤 3.1用真空采样管采集血液标本时须遵守常规注意事项 3.2离心前使标本完全自然形成凝块 3.3全程保证样品管的密闭状态 3.4尽快分离血清，并及时测定 3.5如果标本不能在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在4℃或更低温度的环境中： 3.6冷藏标本室温放置20分钟后再测定； 3.7冷冻标本室温解溶后放置20分钟后再测定 3.8不符合标本处理 3.8.1溶血和乳糜血标本在报告单的备注栏注明 3.8.2标本量过少的标本，严重溶血和乳糜血标本与临床沟通并将标本退回，填写不合格标本拒接登记。 4 试剂和设备 4.1试剂 SIEMENS原装配套试剂 4.1.1试剂组成 该试剂盒由含雌二醇标记试剂、固相试剂和辅助孔试剂的主试剂包，含雌二醇辅助试剂的辅助包，以及雌二醇主曲线卡组成。 组成试剂成份 标记试剂（7.5mL/试剂包）：吖啶酯标记的抗雌二醇绵羊单克隆抗体(~22ng/mL)，置于含牛血清白蛋白、羊γ球蛋白、表面活性剂和防腐剂的缓冲液中。 固相试剂（10.0mL/试剂包）：与磁性乳胶颗粒结合的雌二醇捕捉结合物(~1.7 ng /mL)，置于含牛血清白蛋白、表面活性剂和防腐剂的缓冲液中。 辅助孔试剂（2.5mL/试剂包）：含牛血清白蛋白和防相剂的缓冲液。 雌二醇辅助试剂（10.0mL/试剂包）：释放剂缓冲盐水，含猪肝素和防腐剂。 4.1.2试剂准备：手工混合所有试剂包。肉眼检查试剂底部以确保所有颗粒分散均匀并处悬浮状态，然后将混合物载入系统直接使用 4.1.3试剂保存 试剂2~8℃避光保存，并保持竖直向上 4.2质控品 SIEMENS原装配套质控品 4.3校准品 SIEMENS原装配套标准品。 4. 4警告和注意事项 4.4.1只可用于体外诊断； 4.4.2试剂中含有叠氮钠，请小心处理，请勿吞服或与皮肤粘膜接触！叠氮钠在与铜或铅等重金属接触后会产生有毒的叠氮化物； 4.4.3试剂盒的测定结果仅作为临床各种疾病的辅助诊断依据 4.5仪器 ADVIA Centaur CP 全自动化学发光免疫分析仪 5 操作程序 5.1检测过程流程 签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存 5.2样本签收 严格按标本接收程序签收标本 5.3标本处理 以3000r/min，离心6~10min，分离血清上机测定，若标本不能及时检测，将分离血清冷藏于2~8℃的冰箱内 5.4标本检测 5.4.1手工编排测试项目：在主界面选中样本区域 →选择样本架 →选择样本 →点击Samples区域中的样本类型选择按钮→切换至样本类型→选择样本ID编排区→没有通过扫描样本管条形码输入ID号的样本，在此处手工输入样本ID →然后在Assay Selection 区域选择测试项目 5.4.2样本运行 确认样本装载，必要的样本信息输入完毕→确认所有耗品及试剂已装载 →按START键 开始运行样本。 5.5检验后标本保存 保存在标本冰箱内，保存期为7d 6 校准程序 6.1校准品的准备和储存 将校准品从冰箱中取出，加5ml蒸馏水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min，待充分混匀后分装。-20℃冰冻保存可保存20d，复融后2~8℃可稳定24h。 6.2校准条件 在室内质控失控，或使用新批号试剂，或更换仪器主要配件，或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为28d 6.3校准程序 参见生化组的校准操作程序