第7章色谱分析法导论.pptVIP

第七章 色谱分析法导论 ;基本要求： 了解色谱法的分类及其特点。了解色谱图和保留值、容量因子、分离度等色谱术语。了解色谱定性和定量方法，了解校正因子、相对校正因子，以及归一化法、外标法和内标法等分析方法。;第一节 概论 ;一、色谱分析法应用 ;2.简单定性 回答“是不是”;二、色谱法与色谱分析方法; 在色谱分离装置中，流动的那一相称为流动相，固定不动的那一相称为固定相。 色谱法：是利用混合物各组分在固定相和流动相中具有不同分配系数（或吸附系数、渗透能力等），当两相作相对运动时，这些物质在两相中进行多次反复分配而实现分离。 ;2.色谱法分类 ; 新型：超临界色谱，以超临界状态下的CO2作流动相。接近液体的溶解性和气体的流动性，兼有液相、气相色谱的优点。 ;⑵按固定相的固定方式分类 ;;3、色谱分析法 ;三、色谱分析法的特点： ;3.所需样品量很小（xxμL） 在疾病诊断、病人抽血、刑事侦察方面有较大意义。 4.分析速度快 一次色谱分析一般只需要几分钟～几十分钟，最快只需几秒钟，与高效率的分离和计算机的应用有直接关系。 5.应用范围广 GC与LC相结合，几乎可以分析全部的常见有机物。 ;第二节 色谱图及相关术语;A+B;流动相;二、色谱图 ;;1.基线 没有组分进入检测器时，系统噪声随时间变化的线称为 基线。稳定的基线是一条直线。 2.色谱峰 组分的响应信号随时间变化而形成的峰形曲线。 正常情况下，每一种组份对应一个峰，且色谱峰呈对称性。 3.峰高（h） 峰顶点到基线的距离。;４.峰底宽度（Ｗb） 峰拐点切线与基线延长线相交的截距。 ５.半峰宽（Ｗ１／２） 峰高一半处的峰宽度。 ６.峰面积（Ａ） 峰与基线延长线所包围的面积。;三、保留值 ;2.死时间（t。） 不被固定相保留的组份（如GC中的空气）通过色谱柱所需的时间。 实际上就是流动相流经色谱柱所需的时间。 t。=L/ū （式中 L：柱长 ū：流动相平均线速度) 3.调整保留时间（tR’） 某一组份在固定相中停留时间的总和。 tR’= tR －t0 （即： tR= t0+ tR’ ）;四、相对保留值与选择性; tR2’ ：为后出峰组份的调整保留时间。α总大于1。 α↑，说明两峰相距越远，即两组份的分离效果越好，即方法的选择性越好。是对分离方法的评价指标。;第三节 定性和定量分析 ;二、定量分析 ;㈠峰面积的测量 1.峰高乘半峰宽法（适用于对称峰，不适用于不对称峰或很窄的缝）。 A=1.065hw? 2.峰高乘平均峰宽法（适用于不对称峰） A= h（w0.15+w0.85） 3.用峰高表示峰面积（适用于痕量分析中的对称峰） 4.自动积分仪法（适用于任何峰） ;㈡校正因子 ;2.相对校正因子;㈢定量分析方法 ;优点：①简便，不用称量； ②准确，操作条件对结果影响不大； ③当组份的fi/s相近时，可不必求fi/s而直接 将面积归一化。 缺点：①所有组份都要有峰； ②只对个别组份定量时，比较繁琐。;2.外标法（工作直线法） ;3.内标法 ;优点：①因为Ws/W比值比较稳定，所以进样准确性要 求不高； ②由于通过Ai/ As比值来计算，操作条件稍有变 化对测量结果没有影响。 缺点：①每次分析都???要准确称量试样和内标物； ②必须测定校正因子。 ;对内标物的要求：;色谱分析参考书;色谱法 分配色谱 吸附色谱 排阻色谱 色谱图 色谱峰 基线 保留时间 死时间 调整保留时间;色谱分析法主要分析哪些物质？气相色谱法和液相色谱法在分析对象上各有哪些特点？在应用上又有哪些关系？ 色谱法按分离机理分哪几类？并回答其分离机理。 色谱法按照两相状态和固定相固定方式分别分为哪几类？ 什么是保留时间、死时间和调整保留时间？三者之间有什么关系？;试述色谱峰面积的测量方法（包括计算公式）及适用情况。 什么是绝对校正因子和相对校正因子？两者在应用上有什么不同特点