平板影印与AHBA合成酶基因筛选用于安莎类抗生素产生菌的分离.pdfVIP

第 ??卷 第 ?期? 厦 门：?学 学报 ?自然 科 学版 ?? ??????? ??．?? ????年 ?月? ?????????????????????????????????????????????? ???．????? 平 板 影 印 与 ????合 成 酶基 因筛选 用 于 安莎 类? 抗 生素 产 生 菌 的分 离? 徐? 祯 ，徐 庆 妍 ，胡 志钰 ，郑 忠辉 ，黄 耀 坚? ?厦 门大 学 生 命 科 学 学 院 ，福 建 厦 门 ???????? 摘 要 ：基 因筛选是筛选具有抗生素产生潜力微 生物的新方法 ．针对 筛选 中单菌 落分离纯 化不仅工 作量大 ，而且耗 费时? 间 ，采 用 一 种将 平 板 影 印 技 术 与 ??? 扩 增 技 术 相 结 合 从 土 壤 中 快 速 获 得 具 有 安 莎 类 抗 生 素 产 生 潜 力 的放 线 菌 的方 法．? 根据安莎类抗生素合成途径 中的 ?一氨基一?一羟基苯 甲酸合成 酶 ???????基 因的保 守性 ，通过放 线菌 的培养 、影 印、??—? ???基 因 的 ???扩 增 ，已 从 ??份 土 样 中获 得 ?株 ?????阳性 菌 株 ．结 果 表 明 ：该 方 法 是 一 种 非 常 有 效 的能 够 快 速 获 得? ?????基 因 阳 性 菌 株 的方 法 ，并 且 该 方 法 可 扩 展 用 于 从 土 壤 中分 离 其 他 有 价值 的抗 生 素 产 生 菌 ．? 关 键 词 ：放线菌 ；?一氨基一?一羟基 苯甲酸合成酶基因 ；高通量筛选 ；???扩增 ；平板影 印? 中 图分类 号 ：?????? 文 献标 志码 ：?? 文 章编 号 ：????—????????????—????—??? 放 线 菌 的 代 谢 产 物 是 研 发 临 床抗 生 素 的 主 要 来? 用．这 ?个 酶 中 ，?一氨 基一?一羟 基 苯 甲酸 合 成 酶 ???—? 源 ，目前 已知 的??? 有生 物 活 性 的次 级代 谢 产物 约 有 半? ????是 催 化 ???? 合 成 最 后 一 步 的 酶?。?，由此 检? 数 来 源 于放线 菌 ，这些 具 有 生 物 活 性 的 次 级代?谢 产 物? 测 ?????的存在 与否 判断 放线 菌是否 具有 安莎 类抗? 包 括 ：杀 菌 剂 、肿 瘤 抑制 剂 和 酶???．过 去 的 ??年 ，人 们? 生素 产生 潜力 ?????．? 在 新 药 的探索 中 ，在放 线 菌 分 离 这 一 领域 投入 了大 量? 尽管 基 因扩增技 术使 得人 们更 加容易 寻找 目标抗? 的精 力 ，其 中通 过 传统 筛选 方法 ，从 放线 菌及 真菌 中分? 生素 产生 菌 ，但 在基 因扩 增前 菌株 的分离 、纯化 还无法? 离 获得 许 多天 然产 物 ，有 的已研 发成 药物 ，广泛 地用 于? 实现 高通量 ???¨?．针 对 这 一 问题 ，本 文对 基 因扩 增 技? 临床治 疗 ???，然 而 ，传 统 的筛选 方法 已经无法 满 足 当今? 术 进行 了改 进 ，实现 了高 通量筛 选．建 立 了高通量 筛选? 人 们对