《2012 CLSI及EUCAST更新要点及替加环素药敏测定难点解析》.pptVIP

2012 CLSI及EUCAST更新要点 及替加环素药敏测定难点解析 2012.7.25 四川省人民医院检验科微生物室 黄湘宁;CLSI M100-S22更新要点;2012更新要点;CLSI Document;1.肠杆菌科为什么CLSI再次修订肠杆菌科对厄他培南的折点？;1.肠杆菌科Modified Hodge Test (MHT) (Table 2A Supplemental Table 2 and 3) ;什么时候做MHT？;1.肠杆菌科环丙沙星新、旧折点比较;1.肠杆菌科伤寒沙门菌及肠道外沙门菌环丙沙星药敏试验;1.肠杆菌科沙门菌推荐报告哪些药物？;1.肠杆菌科粪便分离的沙门菌药敏报告策略;1.肠杆菌科肠道外分离的沙门菌药敏报告策略;2.铜绿假单胞菌折点(ug/ml)修订;2.铜绿假单菌折点修订;3.葡萄球菌—青霉素;Induced ?-lactamase Test;β内酰胺酶;;Staphylococcus aureus  Disk Zone Edge Test (10 U penicillin disk and standard disk diffusion method );葡萄球菌—青霉素药敏可选择的策略;EUCAST（欧洲药敏试验委员会）—2012新点;2011-2012 做的工作; 2011年四川省 耐药监测网监测情况 ;多重耐药菌的分布;结果分析（葡萄球菌属）; 结果分析（肠球菌属） ;结果分析;;研究方法：纸片扩散法 研究样本：血液、尿液、痰液等样本 判断标准：参照FDA批准的标准 肠杆菌科：敏感：≥19mm　 中介：15-18mm　　 耐药：≤14mm 对不动杆菌，目前尚无批准折点，本研究参照国外文献 敏感：≥16mm，耐药：≤12mm 　 　　 ;四川省人民医院替加环素对G-菌敏感率（%）;替加环素药敏试验难点解析;Tigecycline 替加环素;替加环素药敏操作难点;1.检测方法对测定结果的影响;1.检测方法对测定结果的影响不同测定方法的选择;1.检测方法对测定结果的影响替加环素 微量肉汤稀释法和Etest法比较 (VRE);1.检测方法对测定结果的影响替加环素 微量肉汤稀释法和Etest法比较streptococcus spp.;1.检测方法对测定结果的影响琼脂稀释法检测MIC与肉汤稀释法检测MIC结果差异倍数的菌株数量分布;1.检测方法对测定结果的影响微量肉汤稀释法和纸片扩散法的比较;1.检测方法对替加环素测定结果的影响; kpn、ecl和sma进行体外药敏实验，得出结论：MHA、MHB与ETEST使用相同培养基时，ETEST结果高一个稀释倍数以上。 对于不动杆菌属，用Etest检测的MIC≥2mg/L的结果要认真分析，因为通常情况下，Etest检测的MIC值在2-4mg/L时，肉汤稀释法均为敏感。 2010年C.James等报道，使用BD的MH培养基，Etest检测的MIC结果比微量肉汤稀释法高。因此，建议Etest检测出TGC不敏感的菌株，应再用肉汤稀释法确认;2.药物自身对测定结果的影响;2.药物自身对测定结果的影响药物配制;水平放置，避免周围气流干扰 建议称量大于10mg，以保证称量结果的准确。（使用小面积纸称量） 称量替加环素需要关闭环境灯光。 称量的药物并非纯度为100%，需要更具药物标准品的说明书进行换算。;若用替加环素临床用药，则将整瓶药粉溶解。 如图： 50mg 若加入 10ml 溶剂则终浓度为 5mg/ml;根据CLSI推荐的方法溶解药物;2.药物自身对测定结果的影响溶解后的药物尽快使用完;2.药物自身对测定结果的影响标准品和临床用药（泰阁）之间的差别;3.培养基对测定结果的影响;3.培养基对测定结果的影响锰离子对Etest法对替加环素测定结果影响的相关报道;3.培养基对测定结果的影响 不同培养基离子浓度不同;3.培养基对测定结果的影响培养基存放温度及存放时间不同对替加环