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elisa免疫測定課件
Program of Urban and Rural Counterpart Support on Clinical Laboratory Technology Standard Development and Training;内 容;ELISA的概念;抗原抗体反应 ;特异性 ;最适比例 ;敏感性;常见问题;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;白 板;花 板;均 板;灰 区;竞争法;ELISA检验方法相关项目;ELISA 常见类型;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;; 钩状效应
强阳性----------------假阴性
方法:稀释后再测
特点:不易发现
避免:结果回顾、诊断提示、临床沟通;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;;正常血清中所含的高浓度的非特异性抗体对间接法的影响;小分子抗原或半抗原缺乏可作夹心法的两个以上的位点;抗原的固相化既可以直接进行,亦可以通过相应特异抗体而间接固相化
;酶及底物;对照设定 ;ELISA操作中的注意事项;溶血标本及混有红细胞的血清易产生假阳性,因溶血血清中含有过氧化酶,造成假阳性
受细菌污染因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶,造成假阳性
在冰箱中保存过久的标本,在间接法ELISA测定中会导致本底过深,造成假阳性
EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性,造成假阴性
标本凝固不全,形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果
标本中有内源性干扰物, 不同程度影响检测结果。常见的干扰物质有:类风湿因子、补体、交叉反应物质和其他物质等
;试剂的准备;?加 样 ;
温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)。
37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。
温育时间足够。
保温的方式一般采用水浴或电热块。
温育的温度和时间应按规定力求准确。
;洗 板;显色;?比 色 ;结果判定;;;酶标仪是垂直光路测定吸光度。垂直光的特点是样本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是易受被测样本液面是否水平,酶标板透光性孔底是否平整等的影响较大。
酶标仪在用单波长测定吸光度时,受到测定干扰(样本的浊度、??扰色等)、电路干扰(包括噪音、漂移、电压等)和液体表面张力的影响也很大。
;;结果的解释;;;;;;HIV和TP阳性结果的处理流程;;谢谢!
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