不同畜禽血样采集.哺乳动物白细胞分离.pptVIP

华中农业大学动物科技学院; 了解哺乳动物白细胞分离原理 掌握兔及猪白细胞分离方法 明确畜禽血液细胞组成差异;二、实验原理;血液 新鲜组织 福尔马林浸泡标本 石蜡标本 冰冻组织 毛发 体腔液 洗嗽液 精液;血液 ;红细胞 ;白细胞 ;血小板 ;血小板遇到粗糙的血管壁伤口，就被破坏并释放出促使血液凝固的凝血酶。这种酶的前身是凝血酶原，在Ca2+参与下，凝血酶原激活物可催化凝血酶原转化为具有活性的凝血酶。;在凝血酶、Ca2+和其它一些因子的作用下，经过一系列变化，可溶性的纤维蛋白原就变成了不溶性的丝状纤维蛋白。这种蛋白形成后，互相交织成网，并把血细胞网罗在内，使原来的血液凝集成块。;3 抗凝;（3）降低血液温度，使酶的活性降低。; 抗凝剂;（2）柠檬酸钠（trisodium citrate），柠檬酸盐可与血中钙离子形成可溶性螯合物，从而阻止血液凝固;（3）草酸钠（sodium oxalate），草酸盐可与血中钙离子生成草酸钙沉淀，从而阻止血液凝固。适用于一般普通生化检查;从血管取少量血液加入适量抗凝剂,有形成分经自然沉降或离心沉淀后，血液可分出三层：上层为淡黄色的血浆，下层为红细胞，中间的薄层为白细胞和血小板 ;5 细胞破碎;方法;渗透冲击法（Osmotic Shock）;在血浆中无机盐形成的渗透压称为晶体渗透压 由血浆蛋白形成的渗透压称为胶体渗透压 血浆渗透压的总值为两者之和。;将正常红细胞悬浮于不同浓度的NaCl溶液中即可看到：在等渗溶液中的红细胞保持正常大小和双凹圆碟形；在渗透压递减的一系列溶液中，红细胞逐步胀大并双侧凸起，当体积增加30%时成为球形；体积增加45%～60%则细胞膜损伤而发生溶血。;细胞破碎的难易决定于其类型，红血球细胞容易溶破，动物组织细胞只有当其组织被机械切碎或匀浆后才易溶破。植物细胞很难溶破，因为植物细胞中含有大量的木质成分。;三、主要仪器及试材;四、实验方法与步骤;五、实验注意事项;六、实验结果处理;七、思考题