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半抗原免疫原的制备
实验一 半抗原免疫原的制备;吲哚乙酸; 半抗原-载体连接方法3;试剂和仪器: 试剂:吲哚乙酸(IAA),牛血清白蛋白(BSA),三正丁胺,N-N’二甲基甲酰胺(DMF),氯甲酸异丁酯,NaOH; 仪器:反应器,磁力搅拌器,微量加样器,滴管等。;实验步骤: 1 52.3mgIAA 2mlN-N’二甲基甲酰胺(DMF) 75μl三正丁胺 40μl氯甲酸异丁酯 磁力搅拌8分钟 形成IAA混合酸酐 2 210mgBSA 11ml蒸馏水 11mlDMF 420μl1mol/lNaOH 搅拌 ;实验步骤: 3 将IAA混合酸酐逐滴加入到BSA溶液中 继续搅拌1h 200μl1mol/lNaOH 搅拌5h 4 反应物装入透析袋 4℃对10%DMF透析1d 对蒸馏水透析4d 5 取出反应物 分装 -20 ℃保存;思考题: 1 小分子半抗原为什么要与载体蛋白先偶联才能作为免疫原? 2 载体蛋白的选择原则。 3 半抗原与载体偶联时??因其所带基团的不同需不同连接方法,试加以简述。
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