13、疾病相关基因的鉴定与基因功能研究-徐斌.ppt

生物化学与分子生物学;第二十四章 疾病相关基因的鉴定与基因功能研究;疾病相关基因是医学分子生物学最重要的领域，因为几乎所有的疾病都与基因结构或表达变化有关，都是遗传因素和环境因素相互作用的结果。;第一节 鉴定疾病相关基因的原则 ;一、鉴定疾病相关基因的关键是确定疾病表型和基因间的实质联系;二、鉴定克隆疾病相关基因需要多学科多途径的综合策略;三、确定候选基因是多种克隆疾病相关基因方法的交汇;第二节 疾病相关基因克隆的策略和方法;一、不依赖染色体定位的疾病相关基因克隆策略;（一）从已知蛋白质的功能和结构出发克隆疾病基因;（二）从疾病的表型差异出发发现疾病相关基因;1. 从疾病的表型出发，比较患者基因组DNA与正常人基因组DNA的不同，直接对产生变异的DNA片段进行克隆，而不需要基因的染色体位置或基因产物的其他信息。 2. 针对已知基因。如果高度怀疑某种疾病是由于某个特殊的已知基因所致，可通过比较患者和正常对照间该基因表达的差异来确定该基因是否为该疾病相关基因。 3. 针对未知基因的，可通过比较疾病和正常组织中的所有mRNA的表达种类和含量间的差异，从而克隆疾病相关基因。这种差异可能源于基因结构改变，也可能源于表达调控机制的改变。;针对未知基因常用的技术有;RDA技术原理和基本过程示意图;;（三）采用动物模型鉴定克隆疾病相关基因;二、定位克隆是鉴定疾病相关基因的经典方法;（一）基因定位的方法;（二）定位克隆的基本程序包括三大步骤;（三）假肥大型肌营养不良基因的克隆是定位克隆的成功例证;三、确定常见病的基因需要全基因组关联分析和全外显子测序;四、生物信息数据库贮藏丰富的疾病相关基因信息;第三节 疾病相关基因的功能研究 ;基因的功能实际是基因产物的功能，也就是编码基因的蛋白质功能和非编码基因RNA的功能，前者是本节讨论的重点。;一、基因比对及功能诠释 ;二、利用工程细胞研究基因功能 ;三、研究生物大分子间的相互作用可确定基因功能 ;四、利用基因修饰动物整体研究基因功能