《高效液相色谱基础知识》讲解.ppt

第一节 岛津LC-10AT型HPLC操作规程; ;一、 系统组成; 二、 准备; ;四、 参数设定;四、 参数设定;五、 更换流动相并排气泡;六、 平衡系统;六、 平衡系统;六、 平衡系统;七、 进样;八、 谱图的判断 及结果计算;八、 谱图的判断 及结果计算;八、 谱图的判断 及结果计算; 九、 清洗管路及进样口; 九、 清洗管路及进样口;【特殊情况】：谱流路系统，从泵、进样器、色谱柱、到检测器通池，在分析完毕后，均应按（5.1）充分冲洗，特别是用过含盐流动相的，更应注意先用水，再用甲醇-水，充分冲洗。 ;谢谢大家！;第二节 岛津LC-10AT型HPLC注意事项 ;一、 流动相; 二、样品;三、色谱柱;三、 色谱柱;四、操作过程;四、 操作过程;四、 操作过程;四、 操作过程;四、操作过程;四、操作过程;自己总结的12条注意事项;1、流动相必须用HPLC级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。 2、流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。 ;3、不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。 4、使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时，然 后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上，以充分洗去离子。对于柱塞杆 外部，做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。 ;;7.C18柱绝对不能进蛋白样品，血样、生物样品。 8.堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查 并清洗。 清洗方法：①以异丙醇作溶剂冲洗；②放在异丙醇中间用超声波清 洗；③用10％稀硝酸清洗。 ;9.气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。 10.如果进液管内不进液体时，要使用注射器吸液：通常在输液前要进行流动相 的清洗。 ;11.要注意柱子的PH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。 12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边清洗，然后插入新的 流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。 ;谢谢大家！;第三节 高效??相色谱中常遇见的问题及处理方法 ;一、 保留时间变化;二、 保留时间缩短 ;三、 保留时间延长 ;四?、 出现肩峰或分叉 ;五、 鬼峰 ;六、 基线噪声 ;七、 峰拖尾 ;八、峰展宽 ;八、峰展宽;谢 谢！