生物与分子生物学复习 复习要点II 标注.docVIP

生物与分子生物学（II）复习要点 DNA的复制和修复 DNA复制的特点： 1． 半保留复制 DNA在复制时，两条链解开分别作为模板，在DNA聚合酶的催化下按碱基互补的原则合成两条与模板链互补的新链，以组成新的DNA分子。这样形成的两个 DNA分子与亲代DNA分子的碱基顺序完全一样。由于子代DNA分子中一条链来自亲代，另一条链是新合成的，这种复制方式称为半保留复制。 2． 有一定的复制起始点 复制子：DNA复制从起点开始直到终点为止，每一个这样的DNA单位称为复制子或复制单元。 复制起点：DNA复制再生物细胞中要从DNA分子上特定的为止开始，这个特定位置称为复制起点，用ori表示。 复制叉：DNA复制的生长点形状如同分叉故称复制叉。 原核（染色体、质粒）、真核（细胞器DNA）——环状链分子 在一个固定的起点开始复制： ①（大多）双向——（两个复制叉或生长点）向两端复制 ②也有单向——（一个复制叉或生长点） 3．需要引物(primer) DNA聚合酶反应需要有引物3’-OH存在 4．双向复制 5．半不连续复制、冈崎片段 冈崎片段：冈崎等人发现短时间内首先合成的是较短DNA片段，接着出现较大分子。最初出现的DNA片段长度约为1000个核苷酸，成为冈崎片段。 半不连续复制：DNA的一条链的复制是半不连续的。 RNA引物的合成：以DNA为模版，NTP为原料，在引物合成酶的催化下，合成十到几十个核苷酸。 为什么？ 保证DNA聚合高度精确。已知DNA聚合酶加油3’-5’外切酶功能校对复制过程中的核苷酸（聚合酶在形成一个磷酸二酯键前，总是检查前一个碱基是否正确）不能从头开始合成。因此先合成一条低忠实性的多核苷酸来开始DNA的合成，并以核糖核苷酸来表示是“暂时”的，当DNA聚合后再将其切除，以高忠实性的的脱氧核苷酸取代，确保复制的忠实性。 重点： 原核生物DNA的复制过程（起始、延伸、终止）(书P421-P424)； 起始位点结构特点（三13 bp，四9 bp共有序列）， 三个13bp的序列和四个9bp的序列。 E.coli 5种聚合酶（III亚基组成、功能）的特点及蛋白因子（SSB，Dna等） DNA聚合酶反应特点： 1、 以四种脱氧核苷酸三磷酸（dNTP）为底物 2、 反应需要接受模板指导 3、 反应需要引物3’-OH存在 4、 DNA链的生长方向是5’-3’ 5、 产物DNA的性质与模板相同 DNA pol I： 理化性质： 1、 一条多肽链，多肽链中含有一个Zn原子 2、 酶分子空间结构近似球体 3、 约含1000个氨基酸残基，MD为103kD 4、 经蛋白酶处理后，分裂成两个片段：大片段（Klenow片段，有聚合酶和3’-5’外切酶活性）和小片段（有5’-3’外切酶活性） 功能： 1、 DNA聚合酶活性（通过核苷酸聚合反应，使DNA链沿5’-3’方向延长。在引物DNA或RNA-OH末端，以dNTP为底物，按模板DNA上的指令有DNA pol I逐个将核苷酸加上去。酶的专一性主要表现在新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有催化作用。） 2、 3’?5’核酸外切酶活性（从3’?5’方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸，对单链作用） 3、 5’?3’外切酶活性（从5’?3’方向水解DNA生长链前方的DNA链，主要产生5’-脱氧核苷酸，双链，切除紫外线照射而形成的胞啶二聚体） 4、 由3’端使DNA链发生焦磷酸解 5、 无机焦磷酸盐与脱氧核糖核苷三磷酸之间的焦磷酸基交换 DNA pol II 催化特性： 1、 5’?3’聚合酶活力：该酶催化DNA聚合，最适模板是双链DNA中间有缺口的单链DNA部分，而且该单链空隙部分不长于100bp 2、 3’?5’外切酶活性，耽误5’?3’外切酶活性 DNA pol III 组成 DNA连接酶的作用， 拓扑异构酶（解螺旋、旋转酶）、 端粒与端粒酶； 复制调节（甲基化） 真核生物DNA聚合酶种类（?、?、?、?、?） DNA损伤修复的几种方式（错配修复、直接修复、切除修复、重组修复、易错修复）； SOS反应（LexA阻遏物和RecA蛋白作用） 无意/错意突变，点突变： 转换与颠换，突变与诱变剂； 突变类型与常见诱变剂种类。 DNA的重组 重点： 重组类型：同源重组、 位点专一性重组、 转座重组） ，Holliday模型， 细菌的基因转移主要有四种机制（接合、转化、转导、细胞融合）， DNA单链的同化、 λ噬菌体的整合与切除、 免疫球蛋白多样性原因， 何谓转座子、 转座的遗传效应。 RNA的生物合成和加工 一、RNA转录合成的条件： 1．底物2．模板（关于模板链/正负链/有意义无意义链） 3．原核生物RNA聚合酶（大肠杆菌RNA聚合酶亚基组成、特点） 真核生物中的RNA聚