右归胶囊对雄激素排致卵障碍型不孕大鼠血清E.docVIP

右归胶囊对雄激素致排?卵障碍型不孕大鼠血清?E2、T和IGF- ?1水平影响研究 方云?芸1 黄金珠2 马 ?洁2 傅春华1 (成?都中医药大学中医临床?学院中医妇科学专业,?成都中医药大学十二桥?校区研究生一公寓21?1室,610000;? 成都中医药大学科技?处) 摘要 目的: ?右归胶囊对雄激素致排?卵障碍性不孕大鼠血清?中E2、T和IGF-?1水平的影响, 以进?一步探讨右归胶囊治疗?不孕症的作用机理。方?法:将43只9日龄S?D雌性大鼠随机分为空?白对照组、模型组、右?归胶囊组、克罗米芬组?。于颈背下注射丙酸睾?丸酮建立ASR大鼠模?型, 第80天开始灌?服右归胶囊制剂,5周?后股动脉取血,并取出?新鲜卵巢组织,观察卵?巢形态学,用放免法检?测血中E2和T水平,?用酶联免疫法检测血清?中IGF- 1水平。?结果: 右归胶囊能够?促进卵泡生长发育及排?出,并有黄体生成, ?降低病理性囊性卵泡数?。右归胶囊能够增加血?清中E2含量(P0?.05),降低血清中?T的含量(P0.0?5),右归胶囊有降低?IGF-1趋势。 结?论: 右归胶囊有可能?通过降低IGF–I和?T,促进T转化为E2?这一途径,从而促进卵?泡生长发育及排出。 ?关键词 右归胶囊；雄?激素；E2；T；IG?F- 1 雄激素致排?卵障碍性不孕大鼠(A?ndrogen-in?duced Ster?ile Rats, ?ASR)是Barra?clough[1]于?1961年首次诱发成?功的,但未进行深入研?究。近年,俞瑾等[2?-3]采用第9日龄S?D雌性大鼠成功的诱发?出ASR模型,ASR?不孕大鼠模型的发病原?因是由于外源性雄激素?影响肾上腺功能,产生?类似肾上腺皮质增生的?雄激素T、DHA增多?,后来发现ASR具有?高雄激素血症、无排卵?性不孕及胰岛素拮抗等?表现。目前现代医学治?疗排卵障碍型不孕首选?药物为克罗米芬,但因?其抗雌激素作用,影响?受精和着床,常常出现?“高排低孕”现象,且?易产生过度卵巢刺激综?合征和多胎等并发症[?4]。中医以肾主生殖?为理论依据,用补肾中?药治疗排卵障碍型不孕?效果显著, 具有一定?的优势。古方右归胶囊?是温补肾阳经典方,出?自《景岳全书》,功效?补肾助阳、填充精血,?临床上常用于治疗月经?后期或伴量少、闭经、?不孕症等多种病症,中?医辨证属肾阳虚精血亏?虚证,该方治疗不孕症?疗效确切。本实验通过?探讨右归胶囊对排卵障?碍不孕大鼠的E2、T?和IGF-1水平影响?, 进一步阐明右归胶?囊治疗不孕症的作用机?理。 1 材料与方法? 1.1 材料 1.?1.1 动物 健康9?日龄SD系雌性大鼠,?出生后母鼠哺乳至22?日龄断奶,专人饲养。?利用自然光照,室温维?持在20℃-25℃,? 动物和饲料均由成都?中医药大学实验动物中?心提供,SD大鼠批号?为:SCXK(川) ?2008- 11。 ?1.1.2 试剂及仪?器 丙酸睾丸酮注射液?(规格:1mLB25?mg):天津金耀氨基?酸有限公司生产,批号?0707031;枸橼?酸氯米芬片(克罗米芬?: 50mg/片),?批号A1102, C?odal Synto? Limited, ?Cyprus/赛普路?斯企业生 产;雌二醇?放射免疫分析药盒,批?号091120,由北?京北方生物技术研究所?提供;睾酮放射免疫分?析药盒, 批号091?120,由北京北方生?物技术研究所提供;胰?岛素生长因子-1酶联?免疫分析药盒,批号D?EZ30653, 由?RD公司提供;可调式?移液器为美国PALL?–Gelman公司生?产。全自动多功能酶标?仪MK3为芬兰雷勃生?产。ILDZ4-01?8离心机为北京医用离?心机厂生产。7836?43型光学显微镜为日?本OLYMPUS公司?生产;BI2004图? 像分析系统仪由成都?泰盟科技有限公司提供?。 1.2 方法 1?.2.1 模型复制及?分组方法 应用SPS?S1310统计软件包?产生的随机数字表,将?43只9日龄SD雌性?大鼠随机分为空白对照?组、模型组、右归胶囊?组、克罗米芬对照组,?共4组；参照俞瑾[2?]等研究方法,于实验?组和模型组颈背部皮下?注射丙酸睾丸酮112?5mg/只(0.05?mL/只)。正常组在?同等条件下饲养,未作?特殊处理;第22日龄?断奶,利用自然光照,?室温维持在20℃左右?, 并由专人在同样条?件饲养.第70日龄(?大鼠体重约150g左?右)阴道开口。连续阴?道涂片2个性周期(1?个性周期为5d), ?观察其阴道上皮细胞有?无性周期变化,阴道上?皮无性周期变化,则提?示无排卵大鼠模型制作?成功。 1.2.2 ?给药方法 从第80d?开始,各组分别按如下?方法给药,按临床用药?,以60kg人为标准?, 按照体重-剂量换?