全国艾滋病测检技术规范.docVIP

全国艾滋病检测技术?规范 第一章 ?样品的采集和处理 1? 范围????本章?规定了用于艾滋病病毒?（HIV）检测的血清?、血浆和全血样品的采?集和处理方法，适用于?HIV抗体检测、抗原?检测、核酸检测、CD?4+/CD8+T淋巴?细胞测定和HIV分离?培养。 2 规范性引?用文件????Gu?idelines f?or Using H?IV Testing? Technolog?ies in Sur?veillance ?WHO/CDS/CS?R/EDC/2001?.16 UNAIDS?/01.22E IS?BN 9713-92?-063-7. 3 ?操作步骤????3?.1 样品的采集和处?理????艾滋病检?测最常用的样品是血液?，包括血清、血浆和全?血。唾液或尿液有时也?可作为测试样品。常用?的血液样品的采集和处?理方法如下：?????3.1.1 血清样?品采集和处理????? 用?一次性注射器（或真空?采血管）抽取一定量静?脉血，室温下自然放置?12h，待血液凝固、?血块收缩后再用3、0?00r/min离心1?5min，吸出血清备?用。????3.1?.1.2 如用滤纸片?采样，则手指或耳垂局?部严格按常规进行消毒?，在刺破皮肤后，迅速?把滤纸片沾上，切勿让?血液滴落在其它物体表?面造成污染。采血后要?待血样干燥后再包装送?检。????3.1?.2 抗凝血样品采集?和处理????3.?1.2.1 用加有抗?凝剂的真空采血管（或?一次性注射器抽取静脉?血，转移至加有抗凝剂?的试管），反复轻摇，?分离血浆和血细胞备用?。????3.1.?2.2 应根据实验要?求选用适当的抗凝剂，?如CD4+/CD8+?T淋巴细胞测定可选用?K3EDTA或肝素或?枸橼酸钠，HIV病毒?分离、核酸定性/定量?检测可选用K3EDT?A或枸橼酸钠。????? ?用于核酸定性检测时，?采集的抗凝全血应在4?8h内分离PBMC和?血浆，否则应在244?8h内分离血浆和血细?胞。病毒载量测定不同?方法对样品的要求见第?四章4.1中表2；C?D4+/CD8+T淋?巴细胞测定样品采集要?求见第五章4.1。?????3.1.3 ?采集样品注意事项?????? 采集样品原则上应按?临床采血技术规范操作?（试剂盒说明书有特殊?要求除外）。????? 采?集样品时应注意安全，?建议采用真空采血管及?蝶形针具，以避免直接?接触血液；直接接触H?IV感染者/艾滋病（?AIDS）病人血液/?体液的操作,应戴双层?手套。????3.?2 样品的保存?????3.2.1 用于?抗体检测的血清或血浆?样品，应存放于-20?℃以下，短期（1周）?内进行检测的样品可存?放于2-8℃。?????3.2.2 用于?抗原和核酸检测的血浆?和血细胞样品应冻存于?-20℃以下，进行病?毒RNA检测的样品如?需保存3个月以上应置?于-80℃。?????3.2.3 用于C?D4+/CD8+T?淋巴细胞测定的样品不?能长期保存，样品采集?时间超过48h则不可?检测。????3.?3 样品的运送?????3.3.1 实验?室间传递的样品应为血?清或血浆，除特殊情况?外一般不运送全血。?????3.3.2 ?应采用WHO提出的三?级包装系统????? 第一?层容器：装样品，要求?防渗漏。样品应置于带?盖的试管内，试管上应?有明显的标记，标明样?品的编号或受检者姓名?、种类和采集时间。在?试管的周围应垫有缓冲?吸水材料，以免碰碎。?随样品应附有送检单，?送检单应与样品分开放?置。????3.3?.2.2 第二层容器?：要求耐受性好、防渗?漏、容纳并保护第一层?容器，可以装若干个第?一层容器。将试管装入?专用带盖的容器内，容?器的材料要易于消毒处?理。????3.3?.2.3 第三层容器?：放在一个运输用外层?包装内，应易于消毒。?在第三层容器外面要贴?标签（数量，收、发件?人）。????3.?3.3 血清和血浆样?品应在28℃条件下由?专人运送。用于CD4?+/CD8+T淋巴细?胞测定的样品应在室温?下18?23℃运送。?每一包装的体积以不超?过50ml为宜。?????3.3.4 运?送感染性材料必须有记?录。????3.3?.5 如分离血浆仍有?困难，可直接将抗凝血?-20℃以下冻存，采?用冰壶冷藏运输，避免?冻融。????3.?3.6 特殊情况下如?需对个别样品进行复测?，可以用特快专递形式?投寄，但必须按三级包?装系统将盛样品的试管?包扎好，避免使用玻璃?容器，以保证不会破碎?和溢漏。????3?.4 样品的接收?????3.4.1 含?有感染性样品的包裹必?须在具有处理感染源设?备的实验室内由经过培?训的、穿戴防护衣的工?