2生化实验导指(修订).docVIP

生物化学 实验指导 ? 海洋?学院生物化学课程组编 20?11年8月10日 目? 录 实验室守则? ………………………………?…………………………………?……………… Ⅱ 海洋学院?实验记录的基本要求 ………?…………………………………?……………… Ⅲ 实验报告?撰写要求 ……………………?…………………………………?………………… Ⅴ 实验一? 糖类的定量测定 ……?…………………………………?……………………… 1 ?实验二 纸层析法分析氨?基酸 …………………………?……………………………… ? 3 实验三 氨基酸含?量的测定 ……………………?…………………………………?…… 6 实验四 蛋?白质的两性性质及等电点的测?定 ……………………………?………… 8 实验五 ? 考马斯亮蓝G-250 法?测定蛋白质含量 ……………?…………………… 10 ?实验六 垂直板聚丙烯酰?胺凝胶电泳法 ………………?…………………………… ?13 实验七 DNA的?提取制备 ……………………?…………………………………?……… 23 实验八 ? 酶活性的测定 ……………?…………………………………?………………… 26 实?验九? 过氧化物酶同工酶?分析 …………………………?…………………………… 2?9 实验十 凝胶层析 ?…………………………………?…………………………………?…… 33 实验十一 酪?蛋白的制备 …………………?…………………………………?…………… 36 ? 实验室守则 一、安全卫生? 所有进入实验室的人员都有?监督实验室安全、卫生、仪器?操作和维护的义务。 在测定?完成后，使用者须做好实验室?的清洁工作，将公用物品归还?原位， 立即将所使用过的试?验台、实验用品等清洗干净，?清除垃圾，并及时归还所借物?品。 实验室安全卫生实行值?日生制，值日生在每天使用完?实验室后进行检查，必须保持?实验室内环境整洁，走道畅通?，设备器材摆放整齐。 禁止?在实验室吸烟、吃东西、乱抛?纸屑杂物。 最后一个离开实?验室的人一定要关好水、电、?门和窗。 二、仪器使用 严?禁在实验台的插孔上使用功率?大的电器。 对于功率大的电?器，如烘箱、马福炉等，请严?格按照要求操作，每天应在晚?上十点前关闭。 烘箱是不锈?钢体的，不能将未洗干净的物?品放进烘箱。不能用不干净的?抹布擦烘箱。 使用离心机，?离心管一定要称重平衡后，对?称放置。 天平，特别是万分?之一的天平不得任意搬动。使?用完毕后应立即清扫天平，以?免化学试剂腐蚀天平。 不能?用实验室的分样器、加样枪加?强酸或强碱，以免腐蚀。 ?气瓶内气体不能用尽，必须留?有剩余压力(如氧气不少于2? Kg/m2)。 有毒或有?腐蚀性气体的实验必须在通风?橱内进行。 实验后的废渣、?废液，要倒在废渣箱和废液缸?中，不准随便倾倒或倒入水池?中。 超净台使用注意事项：?保持干净，紫外灯的使用时需?遮盖前面板。 冰箱：不得放?危险品，或相邻能起化学反应?的药品。 三、实验数据及其?处理 所有实验室存储的样品?、试剂必须如实写好标签，如?样品应有样品名称、存放时间?、存放人。配制的试剂应有试?剂名称、浓度、配制时间和配?制人等。 必须进行至少三次?平行实验，以求得标准偏差。?数据图须标有误差棒。 实验?中，必须如实地记录各种实验?数据。实验后，二星期内完成?实验结果整理，正确处理实验?数据，不得更改原始数据。 ? 海洋学院实验记录的基本?要求 一、实验记录的内容：? 实验记录的内容通常包括实?验设计、实验名称、时间、试?验者、实验材料、实验步骤、?观察指标、实验结果、和结果?的初步分析等内容。 1、实?验设计：实验记录的首页必须?有一份科学规范的实验设计，?实验设计的具体格式和规范另?行要求。 2、实验名称：首?次实验记录必须注明课题名称?和试验名称。 3、实验时间?：每次实验记录必须在记录纸?的左上方按年、月、日顺序记?录实验的日期和时间，如：1?1-08-05 8:0?0-11:00。 4、实验?方法：常规实验方法应在首次?实验记录是注明方法的来源，?详细记录实验的具体操作步骤?。创新或改进的实验方法应当?给出创新和改进的依据，并详?细记录实验过程中的一切现象?和具体的实验操作的细节。 ?5、实验材料：详细记录所采?用的仪器设备名称、型号、生?产厂家及其度量精度。实验动?物和试验植物种属、来源及品?系；主要试剂的生产厂家、规?格型号和生产批号，自制的实?际应在首次记录中详细说明配?制方法、时间及保存条件，试?验若有变更，应在相应的实验?记录中加以说明。 6、实验?环境：对环