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对食品中微生物快速检测方法的探讨.doc
对食品中微生物快速检测方法的探讨
摘 要:在食品卫生监测领域,快速监测食品微生物方法扮演着越来越重要的角色,同时它也能够有效的预防食物中毒或者是肠道传染疾病的发生,这种技术包含很多方法,本文主要对该技术中经常使用的方法进行简要的分析和探讨。
关键词:快速检测;食品;微生物
我国人民的生活在不断的提高,同时,人们在日常生活中也越来越重视食品安全的问题,食品污染当中,微生物是一个重要的污染源,在食品生产过程中的每一个环节都有可能使得食品出现微生物污染的现象,如果食品受到了微生物的污染就会使得食品发生霉变。如果人们食用了这样的食品,就会发生非常严重的食物中毒的现象,尤其是最近几年,我国的环境生态破坏日益严重,菌群的种类和数量都在不断的增多,在这样的情况下,病原微生物对食品安全的威胁会更加的严重,所以在当今社会发展的过程中需要采取有效的措施对食品中的微生物进行检查,防止人们出现食品中毒的现象。
1 即用型纸片法
大型企业生产的一系列微生物测试片可以对菌群的总数和大肠菌群的技术以及霉菌和酵母进行计数,还有一些公司生产出了除上述功能之外还能对葡萄球菌以及沙门菌进行有效的检测的产品,这两种产品在和传统检测方法的配合和传承方面做得非常好。在使用这类产品的过程中一定要注意正确掌握具体的操作方法,同时还应该制定一个更加科学合理的判别方法,这样也能提高检测的准确性。这两种产品的应用还可以有效的克服传统方法中存在的一些缺陷和不足。针对大肠菌群的检测MPN方法所呈现出的效果明显没有PF方法给出的数据准确。霉菌检测的过程中,使用检测纸片一方面可以使检测的方法更加的简单,在36摄氏度就可以完成培养流程,不需要另外设置低温的设备,只需要两天的时间就可以得知检测的结果,和当前国家标准的检验方法相比要在时间上占据非常明显的优势。纸片法和标准法在检测的准确性上基本上没有差别,而且判别也更加的简单。纸片荧光法是利用细菌的一些代谢物质组合成的一种酶。底物反应法,这种方法在使用的过程中要对食品中的大肠杆菌以及大肠菌群的酶进行检验,将荧光产物放在紫外线下进行照射和观察就可以完成检验,还要在纸片上进行灭菌处理,在处理过后要在4℃的温度下对其进行储存,这样一来也大大简化了实验的整体操作过程。
2 生物化学技术
2.1 PCR技术
PCR技术采用体外酶促反应合成特异性DNA片段,再通过扩增产物来识别细菌。由于PCR灵敏度高,理论上可以检出一个细菌的拷贝基因,因此在细菌的检测中只需短时间增菌甚至不增菌,即可通过PCR进行筛选,节约了大量时间,但PCR技术也存在一些缺点:食物成分、增菌培养基成分和其他微生物DNA对Taq酶具有抑制作用,可能导致检验结果假阴性;操作过程要求严格,微量的外源性DNA进入PCR后可以引起无限放大产生假阳性结果;扩增过程中有一定的装配误差,会对结果产生影响。
2.2 基因探针技术
基因探针技术利用具有同源性序列的核酸单链在适当条件下互补形成稳定的DNA、RNA或DNA、DNA链的原理,采用高度特异性基因片段制备基因探针来识别细菌。基因探针的优点是减少了基因片段长度多态性所需要分析的条带数。
3 选择、鉴定用培养基法
在培养基当中加入一些特异性的生化底物和没反应物等,这样就可以使得培养的物质在选择和分离以及鉴定等技术上都存在着十分明显的优势,在很短的时间内就可以很好的将这些环节全部完成。
4 免疫学技术
免疫学技术主要是在检验的过程中应用了抗原和抗体的具体特征相互结合的方法,然后再使用免疫放大的方法来对细菌进行鉴别。这种方法在使用的过程中存在着非常多的优势。它的优势主要体现在样品选择性曾军之后不需要对其进行特殊的分离处理,也就是说使用免疫技术直接就可以对其进行筛选,因为免疫法在使用的过程中能够体现出非常高的敏感度,样品在经过了增菌之后在非常 短的一段时间之内就可以检验出菌群的具体情况,同时抗原和抗体在反应的过程中也不需要很长的时间胶体金层析法可以非常迅速的对黄色葡萄球菌做出反应,方法也十分的简单,不需要其他设备的辅助,在现场检测中能够体现出非常好的检测效果。ATP生物发光分析法是最近几年新出现的一种方法,它主要是检测设备的洁净程度的方法,用这种方法将检测肉类食品的污染情况和食品器具的菌群有着非常好的效果,微型自动荧光酶标分析法可以检测冻肉中的沙门菌,同时还可以很好的体现出便利性和快捷性,同时也可以很好的减少检验的时间,从而也可以很好的对冻肉中的其他进行检测。
5 细菌直接计数法
主要包括流式细胞仪(flow cytometry,FCM)和固相细胞计数(solid phase cytometry,SPC)法。FCM通常以激光作为发光源,经过聚焦整形后的光束垂
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