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人体解剖生理学实验-华南师范大学生命科学学院
人体解剖生理学实验 第八课PPT 动物一侧迷路破坏的效应, 视野的测定, 盲点的测定, 血红蛋白测定, ABO血型鉴定 华南师范大学. 生命科学学院 题目: 动物一侧迷路破坏的效应 视野和盲点的测定 血红蛋白和ABO血型鉴定 作者:胡学军 日期:2012年4月23日 引言: 什么是迷路?迷路功能是什么?p194 什么叫视野?如何测定?p199 什么是盲点?如何检测?p199 什么是血红蛋白?P63 什么是ABO血型?P71 这些实验的基本原理是什么? 今次实验的目的要求是什么? 要记录哪些实验数据? 实验对象与实验材料 蛙 豚鼠 人 氯仿、乙醚;常规手术器械、探针、棉球、滴管、水盆、蛙板、纱布 视野计 遮眼板 米尺 白色、黑色、红色和绿色视标 视野图纸 白纸 铅笔 一次性刺血针 细长滴管 小试管 75%酒精棉球 吸耳球 0.1mol/L盐酸 一次性毛细取血管 稀释管 比色架 0.9%生理盐水 双凹玻片 消毒牙签 抗B定型试剂(黄色,标准A 型血清)抗A定型试剂(蓝色,标准 B型血清) 实验方法 (一)蛙类一侧迷路破坏的效应 先观察蛙正常姿势和游泳(对照) 用纱布包住蛙的躯干部,使其腹面向上握于左手中,翻开下颌用左手拇指压住。用手术剪沿颅底中线剪开黏膜(勿损伤中线两侧的血管),向两侧分离,可看到“十”字形的副蝶骨。迷路位于副蝶骨横突的左右两旁。用手术刀削去薄薄一层骨质,可看到小米粒大的白点,此处即是内耳囊。将毁髓针刺人内耳囊2--3mm,转动针尖,搅毁其中的迷路。 观察蛙游泳和姿势 (二)豚鼠迷路破坏的效应(示范) 取正常豚鼠一只,侧卧保定,使动物头部侧位不动,抓住耳廓轻轻上提暴露外耳道,用滴管向外耳道深处滴注2~3滴氯仿。氯仿通过渗透作用于半规管,破坏该侧迷路的机能。7~10min后放开动物,观察动物头部位置、颈部和躯干及四肢的肌紧张度。 可见到动物头部偏向迷路功能破坏了的一侧,并出现眼球震颤症状。任其自由活动时,可见豚鼠向迷路功能破坏了的一侧作旋转运动或滚动。 (三)视野的测定(2人配合) 观察视野计的使用 明亮光线下调节眼和弧架中心点在同一水平线上 遮一眼,另一眼凝视中心点。实验者从周边向中央移动紧贴弧架的白色视标,直到受试者看到,记下刻度。重复测试一次,得到相同结果后标记在视野图纬度上。 下一次转45°角,重复步骤3,共测8个刻度 5.换红色、绿色视标重复上述步骤测红色和绿色视野大小范围。 6.同法可测另一眼。 (四)盲点的测定 将白纸贴在墙上,受试者立于纸前50cm处,用遮跟板遮住一眼,在白纸上与另一眼相平的地方用铅笔划一“+”字记号。令受试者注视“+”字。实验者将视标由“+”字中心向被测眼颞侧缓缓移动。此时,受试者被测眼直视前方,不能随视标的移动而移动。当受试者恰好看不见视标时,在白纸上标记视标位置。然后将视标继续向颞侧缓缓移动,直至又看见视标时记下其位置。由所记两点连线之中心点起,沿着各个方向向外移动视标,找出并记录各方向视标刚能被看见的各点,将其依次相连,即得一个椭圆形的盲点投射区。 根据相似三角形各对应边成正比定理,可计算出盲点与中央凹的距离及盲点直径。 血红蛋白和ABO血型的测定 取血 方法1: 扎手指取血,一血两用:血红蛋白和血型的测定,要求动作快,难度大。 方法2:试管法,取试管一支,加0.9%生理盐水5滴,用于制备红细胞生理盐水悬液。具体操作参考有关资料。 (五)比色法测血红蛋白 (1) 先检查血红蛋白计的测定管和吸血管是否清洁,如不清洁则依次用自来水、蒸馏水(3次)、95%酒精(2次)和乙醚(1~2次)清洗。 (2)将0.1mol/L盐酸加入测定管中至刻度“2”或“10%”处。 (3)用酒精棉球消毒采血部位,以采血针采血,用吸血管插入流出的血滴深处,吸血至刻度20ul处,拭净外壁,将血液立即吹入测定管的盐酸中。反复吸吹,使吸血管中血液全部进入盐酸液中(避免起气泡)。混匀,10min后,逐滴加入蒸馏水使液体颜色变浅,边加边混匀并与标准比色板比较,至二者颜色相同止。 (4)读出测定管内液体凹面最低处的刻度,即为每100mL血液中血红蛋白的克数。另一方面刻度表示百分率,可参照血红蛋白计的说明换成克数以核对读数。 (六)ABO血型的测定 取一载玻片,左右两侧分别滴加抗A(蓝色)和抗B(橙黄)标准血清。 常规消毒,用70%的酒精棉球对采血部位,采血针,牙签进行消毒。 穿刺采血部位,用牙签取血后,放在抗A血清中混匀,同样方法用另一根牙签(或牙签的另一端)取血放在抗B血清中混匀。 观察现象 注意事项 氯仿有毒性 单眼注视一点,勿转动 消毒针和手指 不要混用混淆血液:牙签两端 摇晃与
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