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微生物生长曲线的制作及特点
什么是微生物的生长曲线? 微生物生长曲线是以微生物数量(活细菌个数或细菌重量)为纵坐标,培养时间为横坐标画得的曲线。一般说,微生物(细菌)重量的变化比个数的变化更能在本质上反应出生长的过程。曲线可分为三个阶段即生长率上升阶段(对数生长阶段)、生长率下降阶段及内源呼吸阶段。 生长曲线 怎样绘制微生物的生长曲线? 微生物生长曲线的绘制方法主要分为:生长量测量法、微生物计数法、还原糖测定法、氨基酸测定法以及其他生理物质的测定。其中生长量测量法又分为测菌丝浓度法、称干重法、比浊法等;微生物计数法又可分为血球计数板法、染色计数法、液体稀释法等。接下来我以大肠杆菌为例给大家简单介绍 一下比浊法测定微生物生长曲线的 方法。 1)接种:取13支装有牛肉膏蛋白胨培养液的试管,贴上标签,按无菌操作法用吸管向每管准确加入0.2mL的大肠杆菌培养液,接种后,轻轻摇荡,使菌体混匀。另一支不接种的培养管用作对照。 2)培养:将接种后的培养管置于摇床上,在37℃下振荡培养。其中9支培养管分别于培养的0、1.5、3、4、6、8、10、12和14h后取出,放冰箱 中贮存。 3)比浊:将培养不同时间、形成不同细胞浓度的细菌培养液进行适当稀释,使光密度值在0.0-0.4范围内,以未接种的牛肉膏蛋白胨液体培养基调零点,在光电比色计上,选用400-440nm波长的滤光片进行比浊,从最稀浓度的菌悬液开始,依次测定。最后,以细菌悬液的光密度值(OD)为纵坐标,培养时间为横坐标,绘制大肠杆菌的生长曲线。 微生物生长曲线的特点? 典型的微生物生长曲线包括四个时期:迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期。 下面我带大家依次了解一下这四个时期的特点以及形成的原因。 特点:生长速率常数为零、菌体粗大、RNA含量增加、代谢活力强、对不良环境的抵抗能力下降。 成因:微生物刚刚接种到培养基之上,其代谢系统需要适应新的环境,同时要合成酶、辅酶、其他代谢中间代谢产物等,所以此时期的细胞数目没有增加。 特点:生长速率最快、代谢旺盛、酶系活跃、活细菌数和总细菌数大致接近、细胞的化学组成形态理化性质基本一致。 成因:经过调整期的准备,为此时期的微生物生长提供了足够的物质基础,同时外界环境也是 最佳状态。 特点:活细菌数保持相对稳定、总细菌数达到最高水平、细胞代谢产物积累达到最高峰、是生产的收获期、芽孢杆菌开始形成芽孢。 成因:营养的消耗使营养物比例失调、有害代谢产物积累、PH值EH值等理化条件不适宜。 特点:细菌死亡速度大于新生成的速度、整个群体出现负增长、细胞开始畸形、细胞死亡出现自溶现象。 成因:主要是外界环境对继续生长越来越不利、细胞的分解代谢大于合成代谢、继而导致大量细菌死亡。 生长阶段 特 征 延滞期 细胞不分裂(不生长),但细胞变大,细胞内RNA含量增高,原生质呈碱性,合成代谢活跃,易合成新的诱导酶,对外界环境变化敏感。接种物中死细胞较多或培养基不丰富时延滞期较长。 指数期 细胞分裂(生长)最快,细胞进行平衡生长,酶系活跃,代谢旺盛。生长速率由营养成分和培养条件决定。 稳定期 新繁殖的细胞与死亡细胞数目相等,菌体产量达到最高,细胞开始储藏糖原、脂肪等储藏物,产芽孢的开始形成芽孢,开始合成次生代谢产物。可能由于营养物的消耗或抑制生长的代谢产物积累,细胞停止增殖,但仍存活。 衰亡期 死亡细胞数目超过新生细胞,细胞形态多样,细胞开始自溶,开始释放次生代谢产物。
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