壮药黄花调气饮的质量控制分析.docVIP

壮药黄花调气饮的质量控制分析 　　壮药黄花调气饮为刘华钢教授根据民间验方，运用壮医独特的“调气机，通三道”治疗原则和临床诊疗经验研制而成的茶剂，该制剂现正在进行制剂注册申请。制剂处方由黄茂、山银花、大枣、浮小麦、甜茶组成，生产工艺为取黄茂、浮小麦、大枣加水煎煮2次，合并煎液，滤过，滤液浓缩成清膏后，加入山银花、甜茶粗粉，烘干，粉碎成粗粉，制成袋泡茶。其具有顺气解毒、调气补虚的功用，可通调气道，顺气解毒，用于四时感冒，尤以虚人感冒、老人感冒、小儿感冒更宜。为了控制制剂质量，对处方中黄茂、山银花、甜茶进行薄层色谱(thin layer chromatography TLC)法鉴别，并采用高效液相色谱(high performance liquid chromatographyHPLC)法测定制剂中山银花的有效成分绿原酸。所建立的方法具有较好的分离度、重复性、专属性，且操作简便准确，可以有效地控制壮药黄花调气饮的质量。 　　1仪器与试药 　　1. 1仪器岛津高效液相色谱仪(包括LC-20A元泵，SIL-20A标准自动进样器，SPD-20A紫外二可见检测器，CTO-20A柱温箱，CBM-20A工作站);SartoriusBP211 D电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司);SK2200 LHC超声波清洗机(上海科导超声仪器有限公司);Agilent8453紫外河见分光光度计(美国安捷伦);LG16 -W高速离心机(北京医用离心机厂);硅胶G板、聚酞胺薄膜(浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂)。 　　1.2试药黄茂对照药材(中国食品药品检定研究院，批号;绿原酸对照品(中国食品药品检定研究院，批号:110753- X00413 );甜茶对照药材(南宁生源中药饮片有限责任公司，经广西中医药大学韦松基教授鉴定为蔷薇科植物甜叶悬钩子Rubus suavissimus S. Lee的干燥叶，批号:100201);甲醇(色谱纯，美国Fisher公司);水为超纯水，其余试剂为分析纯。壮药黄花调气饮(批号20110610由广西中医药大学附属瑞康医院制剂室生产。 　　2 TLC鉴别 　　2. 1山银花取本品0. 5 g，加甲醇10 mL，超声处理30 min滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取缺山银花的阴性对照样品0. 59，同法制成阴性对照溶液。再取绿原酸对照品，加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法实验，吸取上述溶液各2 mu;L分别点于同一聚酞胺薄膜上，以36%乙酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯光(波长365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点。缺山银花阴性样品无相应斑点。见图to 2. 2黄茂取本品3. 5 g，加甲醇30 mL，超声处理1 h,滤过，滤液加于中性氧化铝柱(100~ 200目，10 g,内径为10 mm)上，用40%甲醇100 mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水30 mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇液，用水洗2次，每次20 mL，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取缺黄茂的阴性对照样品3. 59，同法制成阴性对照溶液。再取黄茂对照药材3g，加甲醇30 mL，超声处理1 h,滤过，滤液加于中性氧化铝柱(100 ~ 200目，5g，内径为10 mm)上，从“用40%甲醇100 mL洗脱”起，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法实验，吸取上述溶液各5~10 mu;L分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酷(5 : 5)为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏后，置紫外灯光(波长365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光主斑点。 　　2. 3甜茶取本品1.0 g，加甲醇10 mL，超声处理30 min滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取缺甜茶的阴性对照样品1.0 g，同法制成阴性对照溶液。再取甜茶对照药材0. 59，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法实验，吸取上述溶液各5~10 mu;L分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷色酸乙酷一甲酸(8:2:0.4)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯光(波长365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光主斑点。 　　3 HPLC法测定山银花中绿原酸 　　3.1色谱条件Ultimate色谱柱(250 mm x 4. 6 mm，5mu;m);用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水冰醋酸(20:80:1)