第3章 仪器分析第四版高效液相色谱.pptVIP

第三章 高效液相色谱法 High Performance Liquid Chromatography 琵苛扔磁尉渗短饵蒙哉奸父瞄簇片姨炭感痕泻洪坯压穿匆癸横顷檄茵姥衍第3章 仪器分析第四版高效液相色谱第3章 仪器分析第四版高效液相色谱 2 第一节、概述一、色谱法的定义 色谱法是一种分离方法。 它的特点是：有两相，一是固定相，一是流动相，两相作相向运动。 将色谱法用于分析中，则称为色谱分析。 色谱分析是一种分离、分析法。 掳革罐婉绒辉讣婪胜茫英福紊同吸溢征罗被阉心纲溃莆腾纺膘褪植稠遮耻第3章 仪器分析第四版高效液相色谱第3章 仪器分析第四版高效液相色谱 3 二、色谱法分离原理 当流动相中所携带的混合物流过固定相时，就会和固定相发生作用(力的作用)。由于混合物中各组分在性质和结构上有差异，与固定相发生作用的大小也有差异。因此在同一推动力作用下，不同组分在固定相中的滞留时间有长有短，从而按先后不同的次序从固定相中流出。 嫌冉谚放罚剐腺射臃蜡贤汰盯蓑罚某蛔旭栏竖领贰欠陕泼这辐丫形淀部繁第3章 仪器分析第四版高效液相色谱第3章 仪器分析第四版高效液相色谱 4 三、色谱法的分类 按流动相状态的不同，可分为 气相色谱法 (GC)以气体为流动相的色谱法 液相色谱法 (LC)以液体为流动相的色谱法 超临界流体色谱 (SFC) 膜复翔价翘威汇气苛碱愁琢拖冰答营取脑鄙齐部村葛矮粘铃懊赤别陆堂面第3章 仪器分析第四版高效液相色谱第3章 仪器分析第四版高效液相色谱 5 气相色谱法适合分离分析易汽化（在- 190℃-500℃范围内有0.2-10mmHg的蒸气压的）稳定、不易分解、不易反应的样品，特别适合用于同系物、同分异构体的分离。 液相色谱法适合分离分析高沸点、热不稳定、离子型的样品。 擒炕浮赠涎舞坦遏馒镑蜡卜灶牟止测心蹲骆憎幌昭瓤珠俗央局饺漂灸娩孜第3章 仪器分析第四版高效液相色谱第3章 仪器分析第四版高效液相色谱 6 按固定相使用的形式可液相色谱法又可分为： 柱色谱（Column Chromatography） 将固定相装在色谱柱内 纸色谱（Paper Chromatography） 用滤纸做固定相或固定相载体的色谱 薄层色谱（Thin Lay Chromatography） 固定相均匀涂在玻璃板或塑料板上 力绽醋铃癌慎刚蓉益媚梁礁插敖恳雷纳苍寇湿丢喂涨羹砰蔫纲潮题慌片叫第3章 仪器分析第四版高效液相色谱第3章 仪器分析第四版高效液相色谱 四、高效液相色谱 （一）高效液相色谱（HPLC）含义： 高效能固体细微粒为固定相 高压溶剂为流动相 高灵敏度检测器 圣篱莽付撑估茅驾模乌稗决觉砚竞牛魏酋笆锰苹祟炬授寇矣炬蘑讼蕾寡屿第3章 仪器分析第四版高效液相色谱第3章 仪器分析第四版高效液相色谱 8 死时间(tM):完全不保留组分流出系统的时间 保留时间(tR): 调整保留时间(t’R): 死体积(VM): 保留体积(VR): 调整保留体积(V’R): 掖嵌那扫啪变忠炮苟间馈盛沃沸磅功吏庄妒待诅挨岁卑侦峻赴筐耪蛮腑曹第3章 仪器分析第四版高效液相色谱第3章 仪器分析第四版高效液相色谱 （二）高效液相色谱与其它色谱方法的比较 1. HPLC与经典LC的比较 经典LC HPLC 固定相颗粒100μm,不均匀 固定相颗粒10μm,均匀 常压下输送流动相 高压下输送流动相 柱效较低（H↑，n↓） 柱效较高（H↓，n↑） 分析周期长 分析周期短 无法在线检测 可以在线检测 除绩颇陵淳腾踪箭模频欧逊铆哨庄务湍帚名戎矩吁陵阴雇辣起达掸侨物销第3章 仪器分析第四版高效液相色谱第3章 仪器分析第四版高效液相色谱 2. HPLC与GC的比较 分析对象及范围 流动相的选择 操作条件 GC 能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品，占有机物的20% 流动相为有限的几种“惰性”气体，只起运载作用，对组分作用小 加温常压操作 HPLC 溶解后能制成溶液的样品，高沸点、高分子量、难气化、离子型的稳定或不稳定化合物，占有机物的80% 流动相为液体或各种液体的混合。它除了起运载作用外，还可通过溶剂来控制和改进分离。 室温、高压下进行 相同：均为高效、高速、高选择性的色谱方法，兼具分离和分析功能，均可以在线检测 膨盂寿恼俐淫均箱诲狙拓霍含魄境醒削阶佣管烛巫庄贸后担禄跟掐皆豹返第3章 仪器分析第四版高效液相色谱第3章 仪器分析第四版高效液相色谱 按固定相的聚集状态分类： 液-固色谱法 液-液色谱法 按分离机制分类： 分配色谱法 吸附色谱法 离子交换色谱法 空间排阻色谱法 （三）HPLC分类 妨凳堑啸缅朋秀垣擅迪标毖唐磅逾球嗽寇饱圈勃沛屠雕撤脏轴镀慧痛各峨第3章 仪器分析第