气相色谱法-2-研究生.pptVIP

（二）定量校正因子 1．两种表示方法 续前 2．相对校正因子的测定 3．注意事项： 相对校正因子与待测物、基准物和检测器类型有关， 与操作条件（进样量）无关 基准物：TCD→苯；FID→丁庚烷 以氢气和氦气作载气测的校正因子可通用 以氮气作载气测的校正因子与两者差别大 （三）定量方法 1．归一化法 2．外标法 3．内标法 4．内标对比法 1．归一化法 简便，准确 定量结果与进样量、重复性无关 优点： 色谱条件略有变化对结果几乎无影响 缺点： 所有组分必须在一定时间内都出峰 必须已知所有组分的校正因子 不适合微量组分的测定 2．外标法： 以待测组分纯品为对照物，与试样中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法. a．工作曲线法 b．外标一点法：一种浓度对照物对比样品中待测组分含量 c．外标两点法： 用两种浓度的对照溶液或一种浓度两种进样量与样品溶液对比定量。样品中组分的量为： m1、m2-----对照品的两种进样量（或浓度） A1、A2------与m1m2对应的峰面积 图示 back 3．内标法 对内标物要求： a．内标物须为原样品中不含组分 b．内标物与待测物保留时间应接近且R1.5 c．内标物为高纯度标准物质，或含量已知物质 内标法优点： 进样量不超量时，重复性及操作条件对结果无影响 只需待测组分和内标物出峰，与其他组分是否出峰无关 适合测定微量组分 内标法缺点： 制样要求高；找合适内标物困难；已知校正因子 4．内标对比法 （已知浓度样品对照法） 示例 例1：内标法测定无水乙醇中微量水分 1．在一根3m长的色谱柱上分离一个试样的结果如下：死时间为1min，组分1的保留时间为14min，组分2的保留时间为17min，峰宽为1min。 (1) 用组分2计算色谱柱的理论塔板数n及塔板高度H；(2) 求调整保留时间及；(3) 用组分2 求有效塔板数nef及有效塔板高度Hef；(4) 求容量因子k1及k2；(5) 求相对保留值和分离度R。 （6）分离度达到1.5时，需要最短柱长。 练习 解： 续前 练习 见书后P362题12 解： * 色谱分析 -----研究生 主讲 赵怀清 第五节 分离条件的选择 一、分离度（分辨率）及影响因素 二、实验条件的选择 一、分离度及影响因素 （一）分离度定义式 （二）影响分离的因素 （一 ）分离度定义式 讨论： （二）影响分离的因素 柱选择项 柱容量项 柱效项 1.柱效项及其影响因素： 影响色谱峰的宽窄 主要取决于色谱柱性能及载气流速 续前 讨论： 增加柱效是提高分离度的一个直接有效手段 提高柱效、改善分离的途径：增加柱长；降低板高 根据速率理论，降低板高、提高柱效的方法是： 1）采用粒度较小、均匀填充的固定相（A项↓ ） 2）分配色谱应控制固定液液膜厚度（C项↓ ） 3）适宜的操作条件： ①载气的流速和种类 在低流速时（0～u最佳），B/u项起主导作用，因此选用分子量较大的载气，如N2、Ar，可使组分的扩散系数较小，从而减小分子扩散的影响，提高柱效。 在高流速时（u），u越大，Cu项越大，B/u项越小，此时Cu项起主导作用，因此选用分子量较小的气体，如H2、He作载气，可以减小气相传质阻力，提高柱效。 填充柱，N2的最佳实用线速度为10cm/s~12cm/s；H2为15cm/s ~20cm/s。 ②柱温 选择原则是：在使难分离物质对能得到良好的分离，分析时间适宜，并峰形不拖尾的前提下，尽可能采用低柱温。具体柱温按试样沸点不同而选择： a.高沸点混合物（300℃~400℃）：柱温可低于沸点100℃~150℃，可采用低固定液配比（1%~3%），高灵敏度检测器。 b.沸点300℃的试样：柱温可比平均沸点低50℃至平均沸点的温度范围内选择。固定液配比为5%~25%。 c.宽沸程试样：采取程序升温方法。 举例说明程序升温与恒定柱温分离沸程为225℃的烷烃与卤代烃9个组分的混合物的差别。 图19-8（a）为恒定柱温Tc=45℃，记录30min只有5个组分流出色谱柱，但低沸点组分分离较好。 （b）为Tc=120℃，因柱温升高，保留时间缩短，低沸点成分峰密集，分离度降低。 （c）为程序升温。由30℃起始，升温速度为5℃/min。使低沸点及高沸点组分都能在各自适宜的温度下分离。因此峰形、分离度都好。 增加柱长对分离有利。一般填充柱柱长2m~4m。柱内径常用4mm~6mm。 分离度随n增加而增加，在塔板高度不变的条件下，n与柱长L成正比，因此 2. 柱长和内径的选择