WHO人类精液分析039（参考）.pptVIP

失控的原因 样本混匀不充分 检测人员紧张 技术不精 培训不充分 仪器的问题 质控样本变质 设备尤其是加样器或计数池的更换 操作程序或实验室环境改变 对失控处理 一旦发现质量控制出现失控，必须按以下程序处理： 1.??? 行政处理：（1）立即报告负责人或科主任。（2）当天同项目检测报告不能发出，并向相关技术人员和病人做出解释。 2、技术处理：（1）分析原始数据，；（2）检查质控品，。（3）回顾整个试验操作过程有无失误，包括：标本采集室内温度，湿度，运送，处理，操作过程，仪器故障，电压，以及有无其他干扰因素。（4）重新进行校准，重测失控项目：用新的校准物校准仪器，排除校准失误的原因（5）原因找到后，重新进行质控品测定，如果测定值在控制内，则可进行标本的重新检测，然后发出报告。（6）如果检测结果仍然不稳定，重复性差，质控失控，联系外单位专家 精子计数总量与抽样误差关系 两次计数均数之差可以接受的差异范围 两次计数的总和 Difference between duplicate counts 两次计数均数之差可以接受的差异范围: Poisson 分布 例如,计数200 精子, 可接受的差异是28，计数400 精子, 可接受的差异是39 ， 如果39,需再次取样稀释计数 (WHO 2010) 0 100 200 300 400 500 600 0 10 20 30 40 50 两次计数百分率之差可以接受的差异范围 例如：重复测定400个精子，当平均百分率为20%时，两次之间的差异应该 8%，当平均百分率为5%时，差异应 5%。 如果实际差异超过了此标准，应另外制备2份新鲜样本并重新评估精子活力。 平 均 百 分 率 百分率差异 精子库质控 每周对新合格进行冷冻实验，保证冷冻效果的平稳 每月进行冷冻总结 每月复苏率总结 每月冻后活率总结 冻后A＋B总数总结（达到卫生部要求） 分组竞争 温度湿度控制 温度（室温和排精室20~25 ℃，排精室25℃，冰箱4 ℃ /-18 ℃ ，水浴箱37 ℃ 、培养箱37 ℃ ，液氮罐-196 ℃ ） 湿度（控制在 50%~65%的湿度，除湿机或加湿器控制湿度 。以满足仪器，试剂需要. 通风，防尘措施；安装UPS,避免电磁干扰，仪器周围有一定空间，便于仪器散热；环境清洁，防潮，仪器实验台稳固。 冷冻保护剂质控 对每一批次的冷冻保护剂进行检测，以达到冷冻保护剂的冷冻效果的平稳 冷冻保存的精子不能作为活力和抗精子抗体检测的IQC和EQC 。 DVD视频可作为精子活力检测的QC样本。 DVD视频可作为精子形态学评估的QC样本。 视频对于活力和形态评估的培训尤其有意义, 它们可以补充,但不能替代精液样本的重复评估。 自制活率质控视频 密度80×106，活率65.6% 密度70×106，活率35% 密度50×106，活率33% 密度20×106，活率45% 视频采集的局限性：没有混匀、滴样、计数板、加样枪、温度湿度，是否处理等过程记录 密度质控Xbar图 活率质控Xbar图 巴氏阅片质控图 谢 谢 谢 谢 * * 一、WHO第五版《人类精液分析实验室手册》新技术、新观点学习二、精子库质控 精子库：龙兴宇 第一版 1980 1987 第三版 1992 第四版 1999 第五版 2010 第二版 修订背景 以往精液分析存在问题： 检测方法不一 结果带有主观性、不客观、不真实 精确度低、重复性差 对男性生育力的评估、临床诊断参考价值很有限 因此，需要一个标准化的手册 第五版修订的新特点 推荐采用称重精液质量推测精液体积的方法 使用相差显微镜phase-contrast观察活精子 一些重要的精子形态参数的变化 增加了关于精子冷冻保存的新章节。 一些精液术语（无精症，弱畸精子等）精确定义 精子活力的评估。第五版与先前版本的主要不同在于对精子活力的分级。目前推荐精子活力被分为前向运动PR、非前向运动NR的不动精子IM（而不再分为a, b, c和d级） 总活力（PR+NP），即前向运动（PR），非前向运动（NP）及非运动精子（IM）需在室温或37℃下计量。 第五版本WHO《人类精液检验和处理手册》数据来源、调查方法的特点： 1.?参考人群进行精确定义，参考值的数据，纳入的参考人 群范围广，文献收集更全，多中心，包括前瞻性和回顾性 研究，四大洲，14个国家的4500名男性 ，更具代表 性， 2.??收集了各国新父亲提供的妊娠所需时间（ time-to- pregnancy ，TTP）的数据 3.??检测方