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##学院本科毕业论文答辩 铝胁迫下Gm-ALS3基因的转录表达及基因克隆The transcription and clone of Gm-ALS3 gene under Al stress in soybean 答辩人：赵# 专 业：农业资源与环境 指导老师：@@@ 目录 一、研究背景 二、研究内容 三、研究方案 四、研究结果 五、结论 一、研究背景 Over 30% of the world’s arable soils and up to 70% of potentially arable land are acidic (pH5.5） Acid soils covers 21% of the arable land in China a和b为两近等位基因小麦幼苗 含5umol/L AlCl3的PH=4.3的 200umol/L CaCl2溶液中生长4d a（耐性） b（敏感） 高等植物耐铝机制 （1）、铝诱导有机酸的 （2）、磷酸盐的分泌 （3）、酚类物质的分泌和黏胶的分泌 （4）、其他未知机制 一、外部排斥机制 二、内部忍耐机制 （1）、铝在细胞质中与有机酸和酚类等物质螯合 （2）、液泡的区室化等 研究现状 ALS3 encodes a phloem-localized ABC transporter-like protein that is required for aluminum tolerance in Arabidopsis Larsen等（2005） 大豆 基因芯片 大豆ALS3基因在铝胁迫下表达量明显提高 二、研究内容 1、材料 耐铝大豆品种Jiyu70、铝敏感品种Jiyu62 2、研究内容 （1）、不同铝处理时间下大豆相对根伸长率，根茎叶中铝的积累 （2）铝胁迫处理下大豆ALS3基因的时间、空间表达模式，并且克隆其基因全长序列。 三、研究方案 四、研究结果 铝胁迫对大豆根伸长有抑制作用，并且对Jiyu62的抑制作用比对Jiyu70的抑制作用强 1、Al胁迫条件下不同时间大豆的相对根伸长量 铝胁迫条件下Jiyu70品种比Jiyu62品种根相对伸长率高 2、Al胁迫下不同时间根尖铝含量 相同铝处理条件下，Jiyu62比Jiyu70根尖中铝含量高 铝胁迫条件下根尖铝含量明显增高 3、Al胁迫下大豆根尖ALS3基因的转录表达情况 ALS3基因的转录随着铝处理时间的增长先升高后降低 4、Gm-ALS3基因的克隆以及序列分析 从左向右依次为DL2000DNA MARKER和目的基因 PCR扩增反应获得目的基因 目的基因转化大肠杆菌感受态细胞DH5α 将目的基因与pMD18-T Vector 连接转化到大肠感受态细胞DH5α内，倒置于37℃恒温箱内，过夜培养 大肠杆菌菌液PCR验证 从左向右依次为DL2000DNA MARKER和目的基因 将所得含有目的基因的菌液进行测序，测序后通过NCBI数据库进行比对，结果如下： 五、结论 1、铝胁迫对大豆根伸长有抑制作用，同时根尖铝含量增加。 2、铝胁迫下，大豆ALS3基因转录表达量先升高后降低，可能参与耐铝机制作用。 3、目的基因和pMD18-T Vector成功连接，得到ALS3基因的克隆。