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基因工程原理 Gene Engineering Welcome to Gene Engineering 主讲:杨柯金 主要参考书 杨玉珍.现代生物技术概论.河南大学出版社.2004 吴乃虎.基因工程原理.北京科学出版社. 1999 孙明.基因工程.高等教育出版社. 2006 基因工程期末考试细则 期末试卷为百分制,考试成绩折合70分,平时成绩折合30分。平时成绩分二部分:课堂提问和出勤共占10分;实验成绩占20分。 上课点名缺一次从出勤的10分中直接扣除2分,缺勤两次扣5分,缺勤三次扣7分,缺勤四次以上扣10分,最高扣除10分。 课堂提问:主动回答问题、且回答正确的给2分。被动回答问题、且正确的直接加1分。 以上二项累计不超过10分。 实验共四个,单次最高分为10分,总分为40分,最终总成绩除以2直接计入期末成绩。 第一章 基因工程概述 基因本身也是一个产业 Rockfeller 大学将人肥胖基因出售0.2亿美元(1995年3月) Amgen公司将FKBP神经免疫因子配体转让达3.29亿美元(1997年) Millennium公司以4.65亿美元向Bayer公司转让225种基因的开发权(1998年9月) 一、基因工程的概念 1.基因工程的概念 基因工程也称为基因操作或DNA重组技术,是20世纪70年代以后兴起的一门新技术。 基因工程是指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其他载体分子,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这类分子的寄主细胞内,而能持续稳定地繁殖。 基因工程创造新生物,并给予新生物以特殊功能。 主要原理是应用人工方法把生物的遗传物质,通常是脱氧核糖核酸(DNA)分离出来,在体外进行切割、拼接和重组,然后将重组了的DNA导入某种安全无害宿主细胞或个体,从而改变它们的遗传特性,有时还使新的遗传信息在新的宿主细胞或个休中大量表达,以获得基因产物(多肽或蛋白质)。 基因工程 基因操作原理 基因工程应用(狭义基因工程) 以转基因技术为主线 以构建不同类型的基因工程体(植物、动物、微生物)及其应用为主要内容 以及基因工程在生物医药中的综合应用 基因工程体也称遗传修饰生物体(genetically modified organism,GMO) 基因操作(gene manipulation):对基因进行分离、分析、改造、检测、表达、重组和转移等操作的总称。 仅将基因作为一段DNA分子来操作,进行分析、修饰或转移属于生物化学或遗传学的范畴 只有当基因能够进行大量、可操作性的扩增时才进入基因操作的范畴 基因工程通过基因操作来实现,基因操作是实现基因工程的必需途径 基因工程体的构建J:\生物视频\细胞生物学视频\实验技术\Plasmid_Cloning.mov 基因重组和基因工程之间关系: 基因工程是通过基因重组来实现,但基因重组并不都是严格意义上的基因工程 基因工程专指为实践应用而进行的基因重组事件,产生的基因工程体可以是 生物反应器(如生产酶或活性物质等) 改变了生物性状的工程体(改良生物体品质) 2. 基因工程的诞生与发展 第一个进行基因重组的是美国斯坦福大学的Paul Berg及其同事,他们于20世纪70年代把大肠杆菌和病毒的DNA连接起来 1973年美国加里福尼亚大学的赫伯.博耶(Herbert Boyer)和斯坦福大学的斯坦利.科恩(stanley Cohen)为首的研究小组成功的进行的两个基因重组实验第一次 实现了基因工程的实践,揭开了基因工程的序幕 基因工程诞生的理论基础 20世纪40年代,确定了遗传信息的携带者,即基因的分子载是DNA而不是蛋白质,从而明确了遗传的物质基础问题。 20世纪50年代,揭示了DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制机理,解决了基因的自我复制和传递问题。 20世纪50年代末期和60年代,相继提出了“中心法则”和“操纵子学说”,并成功地破译了遗传密码,从而阐明了遗传信息流向和表达问题。 2. 1 基因是基因重组的物质基础 Griffith 首先用实验证基因的化学本质就是DNA的是美国微生物学家O.T.Avery Hershey和Chase 1952年,Hershey和Chase以32P标记DNA,以35S标记蛋白质外鞘,发现大肠杆菌内控制 其生理活动的因子为DNA,由此证明了噬菌体的遗传物质是DNA,从而进一步证实了,DNA是具有连续性的遗传物质。 1956年,科学家Gierer和Schramm将烟草花叶病毒的蛋白质和RNA提取出来,分别涂抹在健康的烟草
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