药物化学第九章-二氢吡啶类-钙通道阻滞药物的分析.ppt

五、色谱法 （一）高效液相色谱法 ChP2010尼莫地平片的鉴别： 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 （二）薄层色谱法 BP2010硝苯地平的鉴别： 取本品加甲醇制成每1ml 中约含1mg的溶液，作为供试品溶液；另取硝苯地平对照品适量，加甲醇制成每1ml 约含1mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶F254薄层板上，以乙酸乙酯-环己烷（40∶60）为展开剂，展开，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视，供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点一致。 第三节 有关物质的检查 二氢吡啶类药物遇光极不稳定，易发生光化学歧化作用，引入杂质，因此各国药典标准中均规定在避光条件下进行有关物质检查，大多采用HPLC法。 硝苯地平在光照和氧化剂存在条件下分别生成两种降解氧化产物： 杂质I：2,6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯 杂质II：2,6-二甲基-4-(2-亚硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯 1.供试液Ⅰ和Ⅱ的制备 2.有关杂质对照品液Ⅰ和Ⅱ的制备 3.色谱条件 填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶; 流动相：甲醇-水（3 ：2）； 检测波长：235nm。 结果：按外标法以峰面积计算，均不得超过0.1%，其他单个杂质的峰面积不得大于对照品溶液中硝苯地平峰面积(0.2%)，杂质总量不得过0.5%。 第四节 含量测定 一、铈量法 硝苯地平与硫酸铈反应的摩尔比为1∶2。 邻二氮菲-Fe(II)指示剂 终点时（邻二氮菲-Fe(II)指示剂）:微过量的Ce4+将指示剂中的Fe2+氧化成Fe3+，使橙红色配合物离子呈无色，以指示终点的到达。 原理 第九章 二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析 ChP2010硝苯地平的含量测定： 取本品约0.4g，精密称定，加无水乙醇50ml，微热使溶解，加高氯酸溶液（取70%高氯酸8.5ml，加水至100ml）50ml、邻二氮菲指示液3滴，立即用硫酸铈滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，在水浴中加热至50℃左右，继续缓缓滴定至橙红色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硫酸铈滴定液（0.1mol/L）相当于17.32mg的C17H18N2O6。 含量计算公式： 优点： ①以Ce(SO4)2标准溶液稳定，长时间放置、曝光、加热不会引起浓度的变化。 ②Ce4+还原为Ce3+是单电子转移，不是生成中间价态，反应简单，副反应少。 ③大部分有机物不与Ce(SO4)2作用，不干扰测定。 ④特别适用于糖浆剂以及片剂等制剂药物的测定。 终点指示： ①Ce4+为黄色，Ce3+为无色， Ce4+可自身作为指示剂，但不够灵敏。 ②常用邻二氮菲作为指示剂，即稍过量的Ce4+将指示液中的Fe2+氧化成Fe3+，使橙红色配合物离子呈无色，以指示终点的到达。 如：尼莫地平，尼群地平，非洛地平，硝苯地平采用该法定量。（ChP2010） 二、紫外-可见分光光度法 ChP2010尼群地平软胶囊的含量测定 三、高效液相色谱法 ChP2010尼莫地平分散片的含量测定 设计一种容量分析方法测定其含量（名称、原理、溶剂、滴定剂、指示剂、取样量及操作） 第五节 体内二氢吡啶类药物的分析 氨氯地平分子结构中含有一个手性碳原子，故具有一对光学异构体R-(+)-氨氯地平与S-(-)-氨氯地平，仅S-(-)-氨氯地平具有血管扩张作用，其中左旋氨氯地平药效是消旋氨氯地平的2倍，因此需进行血浆中氨氯地平对映体的手性分离与立体选择性药动学研究。 人血浆中氨氯地平对映体的固相萃取LC-MS/MS法测定： 样品处理：血浆样品1.0ml，与1.0ml用流动相制备的内标溶液(10 ng/ml)混合后，取1.8ml上载至C18固相萃取柱(萃取柱预先用含2.5%氨的甲醇1.0ml洗涤2次，再用5mmol/L醋酸铵溶液1.0ml冲洗平衡)，分别用5mmol/L醋酸铵溶液1.0ml和水-甲醇(65:35)1.0ml洗涤，再用含2.5%氨的甲醇1.0ml洗脱，洗脱液在60℃下于旋转蒸发器上蒸发至干，残渣物加250μl流动相溶解，吸取100μl注入液相色谱-质谱联用系统进行分析。 色谱与质谱条件 色谱柱为Chiral-AGP柱(150mm×4.0mm，5μm)，流动相为10 mmol/L醋酸铵缓冲液(pH4.5)-正丙醇(99:1)，流速0.9 ml/min，柱温30℃。APCI离子源，温度350℃，辅助气(N2)流速2 L/min，气帘气(N2)压力410kPa流速1.2 L/min，电晕放电电流2?A，正离子选择反应监测(