【2017年整理】5-FU代谢酶基因型多态联合检测与胃肠癌化疗的评估 --已打印.docVIP

PAGE PAGE 1 江苏省科技计划项目任务书 项目名称： 5-FU代谢酶基因型多态联合检测与胃肠癌化疗的评估 　 承担单位： 　　　江苏省肿瘤医院　　　　　　　　　　　 所在地区： 　 南京市　　　　　　　　　　　　　　　 单位地址： 南京市玄武区百子亭42号 邮编： 210009　 项目负责人： 陆建伟　　　 电话： 3283510　 主管部门： 江苏省卫生厅　　　 申报日期：2003年 05月 16日 江苏省科学技术厅 二ΟΟ三年制 立项依据 本项目国内外科技创新发展概况和必威体育精装版发展趋势； 胃肠道癌是最常见的恶性肿瘤。目前我们收治的病例多数为进展期，单纯手术常难以根治，化疗在综合治疗中发挥了重要作用，成为治疗胃肠道癌的主要方法之一。5－氟尿嘧啶（5－FU）是治疗胃肠道癌最常用的化疗药物之一。5－FU进入体内后，大约85％的药物被二氢嘧啶脱氢酶（DPD）灭活。其余部分被胸苷磷酸化酶转化成FUdR。在胸苷激酶的催化下，FUdR进一步磷酸化为有活性的5—FU代谢物，5－氟－2－脱氧尿苷一磷酸(FdUMP)。在还原型叶酸辅因子即5，10—亚甲基四氢叶酸（MTHFR）存在条件下，FdUMP与胸苷酸合成酶（TS）形成一种稳定的共价络合物。TS能催化dUMP形成dTMP，TS导致dTMP的耗竭，从而干扰DNA的合成和修复。因此在这个过程中，DPD、TS以及MTHFR表达增高将对5－FU的抗瘤活性和毒性具有一定的影响。 DPD是一种5－FU分解代谢限速酶。在不同个体中，其活性最大波动范围可达20倍。DPD活性低的患者不能有效灭活5－FU，导致过量生成5－FdUMP，从而引起致命的胃肠、血液、神经毒性，反之，则降低5－FU的抗瘤作用。目前认为DPD存在遗传性缺乏。迄今至少报道了20种与DPD活性降低相关的基因突变。在人群中，3％～5％的个体携带灭活DPD的基因突变杂合子，0．1％的个体携带DPD基因突变纯合子。认为约50％的DPD灭活等位基因是非功能性等位基因。是由邻接DPYD基因第14外显子的GT拼接供位恒定区发生了G→A转位突变所致。该等位基因（各为DPYD＊2A）导致第14外显子的遗漏（不表达），从而引起一种无功能的蛋白质表达。一些研究认为DPYD＊2A等位基因与5－FU化疗引起的毒性和疗效相关[1]。但是在一些5－FU严重毒性反应的患者中并没有检测到DPYD基因编码突变[2]。使DPD活性调控分子机制变得错综复杂，需要扩大病例进一步研究。 已经证实TS基因的遗传多态性对5－FU的化疗疗效具有较大的影响。TSmRNA和蛋白水平均与5－FU的临床抗肿瘤效应呈负相关。TS基因5`端启动子中的一个串联重复序列（TSER）存在多态性。它含有多个拷贝重复序列的等位基因，分别命名为TSER＊2（2R）、TSER＊3（3R）、TSER＊4（4R）、TSER＊5（5R）、TSER＊9（9R）。研究显示2R、3R是最重要的等位基因型[3]。在中国和日本人中3R／3R基因型的发生率（67％）明显高于白种人和西亚人（38％）。许多实验研究认为增加重复序列的数量导致TSmRNA水平及蛋白质表达的升高。2000年Uricht等[4]通过检索表达顺序标签库发现TSmRNA 3＇非翻译区的（3＇-untranslated region, 3＇-UTR）的1494bp处存在6bp核苷酸片段的缺失或插入。最近我院分子流行病研究室发现TS基因的这一多态性与胃癌的发生有协同关系[5]，但与癌症治疗的关系国内外未见报道。Pullarkatt等[6]发现3R／3R纯合子个体的TSmRNA水平比2R／2R纯合子个体高3．6倍，比2R／3R杂合子个体高1．7倍。在50例结直肠癌病例中，2R／2R纯合子患者的5－FU化疗的有效率（50％）明显高于3R／3R纯合子（9％）和2R／3R杂合子（15％）患者。Yoshinori等[7]对115例术后口服5－FU化疗胃癌病例进行TS基因型分析，发现3R／3R纯合子患者的生存明显差于2R／2R和2R／3R患者。因此胃肠道病人TS基因型的遗传多态性的检测有可能成为5－FU化疗疗效的预测指标。 MTHFR是调节叶酸代谢的限速酶。MTHFR的底物5，10－亚甲基四氢叶酸参与TS将脱氧尿苷(dUMP)转化为脱氧胸苷一磷酸(dTMP)的过程。同时5，10－亚甲基四氢叶酸通过MTHFR代谢成为5－甲基四氢叶酸，后者再经蛋氨酸合成酶的催化作为甲基供体使同型半胱氨酸转化为蛋氨酸。研究发现MTHFR具有基因遗传多态性，其中最常见的是677C→T多态和1298A→C