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湛江地区淋球菌流行株质粒谱型的研究湛江地区淋球菌流行株质粒谱型的研究临床皮肤科杂志 2000年第3期第29卷 临床及实验研究作者:李国明 陈群 王胜春单位:广东医学院微生物学教研室,湛江,524023关键词:奈瑟氏淋球菌;耐药性;质粒谱摘要:为探讨淋球菌耐药谱与质粒谱之间的相互关系,对1998年~1999年广东省湛江地区分离鉴定出的98株淋球菌,以碱裂解法进行质粒的抽提,并分析质粒谱型的分布情况。结果显示98株淋球菌流行株,检出质粒的有90株,占91.84%;质粒谱型12种,以7.4kb+4.2kb,39.5kb+7.4kb+4.2kb为主,占38.76%。从而揭示湛江地区淋球菌流行株质粒的分布现状,为该地区淋病的分子流行病学研究打下了基础,但质粒谱与耐药性之间的关系尚有待进一步探讨。Study on the plasmid profiles of epidemic Neisseria gonorrhoeae strains in ZhanjiangLi Guoming Chen Qun Wang Shengchun(Department of Microbiology, Guangdong Medical College, Zhanjiang, 524023)Abstract In order to probe the plasmid profiles(PP) and their distributions of N. gonorrhoeae, the plasmids of 98 gonococcal strains obtained from 1998 through 1999 in Zhanjiang(Guangdong) were extracted by alkaline lysis technique. Then analysis of the distributions of plasmids profiles was performed. The results showed that 90 strains of N.gonorrhoeae harboured plasmids, the detected percentage accounting for 91.84% . There were 12 types of PP. The PP types of 7.4kb+ 4.2kb and 39.5kb+ 7.4kb+ 4.2kb were prominent(38.76% ). The study indicated the plasmid distribution of N.gonorrhoeae in Zhanjiang and made a basis for the molecular epidemiological study of gonorrhea in this area. The relationship between PP and the resistance to antimicrobials has to be investigated in future.Key words Neisseria gonorrhoeae Drug resistance Plasmid profile淋病目前是我国性传播性疾病(STD)中发病率最高的病种。随着抗生素的广泛应用,细菌染色体突变及耐药基因的转移等原因,淋球菌对抗生素的耐药日渐增多。单用抗菌药物耐药谱来分析耐药菌株的流行趋势意义不大,它不能区分某一地区的耐药菌株是新近传入株或是原有耐药株的变异。质粒谱分析是近几年用作质粒分析的分子生物学技术,包括琼脂糖凝胶电泳检测细菌的质粒特征和采用限制性内切酶对质粒作同源性分析。耐药谱结合质粒谱分析有助于鉴定不同地区来源的分离株,以及对淋病患者进行耐药性监测和传染源的追踪。我们对湛江地区1998年~1999年分离鉴定出的98株淋球菌进行了质粒谱的分析研究,现将结果报告如下。1 材料和方法1.1 菌株来源:从1998年~1999年本院附属医院、湛江市第二人民医院、湛江农垦中心医院皮肤性病门诊病人中分离鉴定出98株淋球菌。WHO标准菌株由美国疾病控制中心(CDC)的Campbell博士惠赠。1.2 培养基:英国Oxiod公司生产的GC琼脂。1.3 质粒抽提:质粒抽提方法参考《分子克隆实验指南》,并加以改良,具体操作简略为:将24h纯培养的细菌用生理盐水刮洗入Eppendof管,离心后的沉淀重悬于100μL预冷的溶液I(25mmol/LTris.HClpH8.0,10mmol/LEDTApH8.0,溶菌酶10mg/mL),剧烈振荡,冰浴10min;加200μL新鲜配制的预冷的溶液Ⅱ(3%SDS,0.2mol/
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