《基因工程的基本操作程序》学案1.docVIP

基因工程的基本操作程序2007-12-10 【学习要求】 1．简述基因工程的原理及技术分析基因工程研究的理论基础 2．简述基因工程基本操作程序的四个步骤 3．说出目的基因的获得、运载体的构建、目的基因的导入与检测等常用的方法及其基本原理 【自主学习】 1．基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤： （1）__________________________________（2）__________________________________ （3）__________________________________（4）__________________________________ 2．目的基因的获取——实施基因工程的第一步 （1）目的基因的含义：主要指____________________________________ （2）目的基因的获取途径： ①从基因文库中获取目的基因（从自然界中已有的物种中分离出来） 基因文库： 部分基因文库： 基因组文库： cDNA文库 ②利用PCR（聚合酶链式反应）技术扩增 原理： DNA双链 的原理，将基因的核苷酸不断地加以复制，使其数量呈 方式 增加。 大致过程： 3．基因表达载体的构建（制备重组DNA分子）——基因工程的核心 （1）构建目的： ①____________________________________________________________ ②____________________________________________________________ ③____________________________________________________________ （2）基因表达载体的组成（构建零件）及其作用（图解） 结构名称 存在部位 作用 启动子 终止子 标记基因 目的基因 4．目的基因导入受体细胞(转化受体细胞) (1)转化： (2)转化方法： 导入植物细胞的方法 导入动物细胞的方法 导入微生物细胞的方法 5．目的基因的检测与鉴定 （1）分子水平的检测（筛选出获得目的基因的受体细胞） ①检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因（目的基因能否在真核生物中稳定遗传） DNA分子杂交技术 ②检测目的基因是否转录出mRNA（目的基因是否发挥功能） ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 （2）个体生物学水平的鉴定（培养受体细胞、诱导目的基因表达、分离目的基因表达产物） 【巩固练习】 1、下列有关基因工程操作顺序的组合中，正确的一组是（ ） ①目的基因的检测与表达 ②目的基因与运载体结合③将目的基因导入受体细胞 ④目的基因的提取 A、①②③④ B、④③②① C、④②③① D、③④②① 、下列属于基因运载体所必须具有的条件是（ ） ①具有某些标记基因 ②具有环状的DNA分子 ③能够在宿主细胞中复制 ④具有多个限制性内切酶 A、①② B、③④ C、①③ D、②④ （ ）（ ）（ ）下列关于基因工程的叙述，正确的是（ ） A、转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的 B、抗虫棉的虫基因可避过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染 C、通常用一种限制性内切酶处理目的的基因DNA，用另一种处理运载体DNA D、为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体（ ）（ ）基因工程又叫基因拼接技术。 (1)在该技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的为板，成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成。 (2)基因工程中常用受体细胞有细菌、真菌。 (3)假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制性内切酶切割运载体与且的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。连接产物至少有种环状DNA分子，它们分别是。12．1979年，科学家将动物体内的能够产生胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组并且在大肠杆菌中表达成功。如下图，请回答： （1）图中表示的是采用 合成基因的方法获得 基因的过程。 （2）图中①DNA是以 为模板， 形成单链DNA，在酶的作用下，合成双链DNA，从而获得所需要的基因。 （3）图中②代表的是 ，在它的作用下将质粒（ DNA）切出