软骨细胞膜蛋白低密度脂蛋白受体相关蛋白1低表达的意义.docVIP

软骨细胞膜蛋白低密度脂蛋白受体相关蛋白1低表达的意义 杨二平1，彭 飞2，梁 杰1，杜远立1(1三峡大学人民医院宜昌市第一人民医院，湖北省宜昌市 443000；2武汉大学人民医院，湖北省宜昌市 443000) 引用本文：杨二平，彭飞，梁杰，杜远立. 软骨细胞膜蛋白低密度脂蛋白受体相关蛋白1低表达的意义[J].中国组织工程研究，2016，20(15):2171-2177. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.15.006 ORCID: 0000-0002-8538-3658(杨二平) 文章快速阅读： 文题释义： shRNA：short hairpin RNA 的缩写，短发夹RNA，包括两个短反向重复序列，利用细胞内的Dicer酶，生成相应的干扰RNA，干扰RNA合成。 NF-kB：NF-κB为一个转录因子蛋白家族，NF-κB信号通路在细胞因子诱导的基因表达中起关键性的调控作用。 摘要 背景：肿瘤坏死因子α是骨关节炎主要致病因子，主要通过激活核因子KB信号通路活性实现软骨细胞炎症反应。细胞膜蛋白低密度脂蛋白受体相关蛋白1参与调节多种细胞因子诱导的细胞炎症反应。 目的：观察大鼠软骨细胞膜蛋白低密度脂蛋白受体相关蛋白1对炎症因子肿瘤坏死因子α反应中的作用。 方法：将慢病毒包装的低密度脂蛋白受体相关蛋白1-shRNA转染原代培养的软骨细胞。转染3 d后用核因子κB磷酸化抑制剂Bay 11-7082(10 μmol/L)预处理的阴性对照组和shLRP1组软骨细胞30 min，肿瘤坏死因子α(30 μg/L)分别作用两组软骨细胞30 min，收集总蛋白并进入后续Western blot的实验，测定相关胞内信号蛋白表达情况, 收集总RNA并行Real-time PCR实验检测相关RNA表达情况。收集肿瘤坏死因子α(30 μg/L)作用软骨细胞12 h的培养基行ELISA检测基质金属蛋白酶13表达水平。 结果与结论：①慢病毒介导敲低低密度脂蛋白受体相关蛋白1后的软骨细胞肿瘤坏死因子α受体1表达增加；②肿瘤坏死因子α作用后的shLRP1组软骨细胞核因子kB通路较对照组均有明显激活，诱导型一氧化氮合酶表达增加；③ELISA检测提示shLRP1组胞外基质金属蛋白酶13浓度增加；④结果提示，软骨细胞膜蛋白低密度脂蛋白受体相关蛋白1低表达对炎症因子肿瘤坏死因子α的作用表现为激活核因子kB通路和提高骨关节炎相关的蛋白基质金属蛋白酶13表达以及易凋亡。 关键词： 组织构建；软骨细胞；低密度脂蛋白受体相关蛋白1；肿瘤坏死因子α；慢病毒；NF-kB； 主题词： 软骨细胞；肿瘤坏死因子α；NF-kB；组织工程 缩略语： 低密度脂蛋白受体相关蛋白：lipoprotein receptor low-density lipoprotein receptor-related protein，LRP Knockdown of low density lipoprotein receptor-related protein 1 in chondrocytes Yang Er-ping1, Peng Fei2, Liang Jie1, Du Yuan-li1 (1Three Gorges University People’s Hospital, Yichang First People’s Hospital, Yichang 443000, Hubei Province, China; 2Renmin Hospital of Wuhan University, Wuhan 430060, Hubei Province, China) Abstract BACKGROUND: Tumor necrosis factor α, as a pathogenic factor, induces the inflammatory reaction mainly via the activation of the nuclear factor kappa B signaling pathway. Low density lipoprotein receptor-related protein 1 (LRP1) is involved in the regulation of the inflammatory reaction induced by cytokines. OBJECTIVE: To study the effect of knockdown of LRP1 on tumor necrosis factor α-induced inflammatory