结肠癌组织AKIP1、PKA及P65的表达及意义.docVIP

结肠癌组织AKIP1、PKA及P65的表达及意义 　　[摘要] 目的 探讨结肠癌组织AKIP1、PKA及P65的蛋白表达情况及其临床意义。 方法 选择手术切除的结肠癌组织标本及同源癌旁组织标本各37例，采用免疫组化SP法对组织进行染色，观察结肠癌组织及癌旁组织中AKIP1、PKA及P65的表达差异及其相关性，同时观察结肠癌组织AKIP1、PKA及P65表达与结肠癌组织恶性程度及病例分期的相关性。 结果 结肠癌组织AKIP1、PKA表达强度低于癌旁组织，差异有统计学意义（u = 77.42，P 0.05；u = 38.09，P 0.05），结肠癌组织AKIP1、PKA阳性表达率（67.6%、75.7%）低于癌旁组织（94.3%、91.9%），差异有统计学意义（χ2=15.51，P 0.05；χ2=10.16，P 0.05）；结肠癌组织P65表达强度高于癌旁组织（u = 22.07，P 0.05），结肠癌组织P65阳性表达率（91.9%）高于癌旁组织（62.2%）（χ2=27.07，P 0.05），结肠癌组织中AKIP1与PKA表达呈正相关（r = 3.106，P 0.05），与P65表达呈负相关（r = -0.40226，P = 0.05）。不同TNM分期的结肠癌组织中AKIP1、PKA及P65的表达，两两相比，差异有统计学意义（u = 11.92，P 0.05；u = 8.17，P 0.05；u = 18.02，P 0.05）；不同分化程度的结肠癌组织中KIP1、PKA及P65的表达，两两相比，差异有统计学意义（u = 22.09，P 0.05；u = 12.09，P 0.05；u = 27.94，P 0.05）。 结论 结肠癌组织中存在AKIP1、PKA及P65过度表达现象，并且同结肠癌的生物学行为相关，其可能通过相互调控参与结肠癌的发生发展。 　　[关键词] 结肠癌；AKIP1；PKA；P65 　　[中图分类号] R735.35 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）09（b）-0076-03 　　结肠癌是我国中老年人高发的恶性肿瘤，发病率在所有恶性肿瘤中位居前列。结肠癌具有高度恶性生物学行为特性，常发生侵袭、转移。既往的研究结果显示，结肠癌的发生发展同肿瘤相关基因的表达异常密切相关，抑癌基因的表达低表达或缺失是恶性肿瘤发生发展的主要原因之一。AKIP1、PKA及P65均是与细胞增值及凋亡有关的细胞因子，在恶性肿瘤的发生、发展中具有重要的意义[1]，本研究对近年来山东省青岛市胶州中心医院（以下简称“我院”）手术切除的结肠癌组织标本的AKIP1、PKA及P65的表达情况进行研究，有望为进一步探讨结肠癌的发生及发展机制提供参考。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　选择我院2008年4月～2011年10月手术切除的结肠癌组织标本37例，并选择同源癌旁组织标本37例，组织标本来源男22例，女15例，年龄42～82岁，平均（61.0±17.2）岁。肿瘤TNM分期，其中Ⅱ期26例，Ⅲ期11例，其中高分化腺癌10例，中分化腺癌14例，低分化腺癌13例，入选标本均具有完整病例资料，所有患者术前均未接受新辅助化疗、放疗，且无合并其他系统恶性肿瘤及既往有恶性肿瘤切除病史。 　　1.2 主要仪器及试剂 　　HH-601型恒温水浴箱购自于上海精密仪器厂，摄像显微镜购自于日本奥林巴斯公司，兔抗人AKIP1、PAK及P65单克隆抗体购自于Sigma公司，其他试剂及分析纯购自于南京建成生物工程研究所。 　　1.3 蛋白测定 　　1.3.1 免疫组化染色方法 常规固定及石蜡包埋的组织标本常温切片，组织切片脱蜡水化后采用高压修复抗原，过氧化氢阻断过氧化氢酶活性，滴加非免疫山羊血清，室温孵育12 h，消除内源性抗原杂质。滴加一抗后孵育12 h后，滴加二抗，充分反应后滴加反应终止液终止反应。显色、返蓝、固定透明、封片，拍照及光镜观察。 　　1.3.2 评价标准 标本免疫组化染色后采用积分法，淡蓝色背景下含有棕黄色团块或颗粒为阳性染色细胞，400倍镜下观察，随机选择5个检测视野，观察细胞的阳性强度及阳性率。阳性细胞率80%计4分，50%～80%计3分，25%～50%计2分，1%～25%计1分。染色强度从阴性至强阳性分别计0～3分，结果根据计数率与染色强度得分相乘结果判断，其中8～12分为+++，4～7分为++，1～3分为+，0分为-。 　　1.4 统计学方法 　　采用SPSS 13.0统计学软件进行处理，计数资料率的比较采用χ2检验，等级资料比较采用u检验，相关性分析采用Spearman相关性分析，P 0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1