热休克蛋白27与磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义.docVIP

热休克蛋白27与磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义 　　[摘要] 目的 通过检测热休克蛋白27（HSP27），磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）在原发性肝癌中的表达，探讨两者在诊断原发性肝癌及临床病理特征的意义。 方法 采用免疫组织化学染色SP法检测重庆市巴南区人民医院32例手术切除的原发性肝癌组织、30例肝硬化组织、25例肝脏良性占位组织及31例肝炎组织中GPC3、HSP27的表达，并分析其与原发性肝癌临床因素之间的关系。 结果 HSP27其在肝癌组织中高表达阳性率为56.25%（18/32），GPC3在肝癌中的阳性率为87.50%，HSP27和GPC3均在肝癌组织中高表达，与肝硬化、肝脏良性占位、肝炎组织中的表达水平比较，差异有统计学意义（P 0.05）。HSP27在肝癌组织的表达与肿瘤的病理分级及TNM分期有关，但GPC3的表达与肿瘤的病理分级及TNM分期无关。 结论 HSP27、GPC3在肝癌组织中高表达，与肝癌的发生、发展、转移有密切联系，可能成为新的肿瘤标志物。 　　[关键词] 热休克蛋白；磷脂酰肌醇蛋白聚糖3；原发性肝癌；免疫组织化学 　　[中图分类号] R735.7 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）08（b）-0007-04 　　原发性肝癌（primary hepatic cancer，PHC）是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，其恶性程度高，往往发现的时候已属晚期，治疗效果差，故早期诊断对于肝癌患者的预后至关重要。甲胎蛋白（AFP）目前是唯一应用最广的肝癌标志物，在肝癌的诊断、治疗及疗效监测中具有重要的作用。但是在活动性肝病，妊娠、生殖腺胚胎源性肿瘤和少数肾、胰、结肠、直肠癌也可有AFP的增高，显示AFP诊断肝癌的局限性。由于肝细胞癌具有较高的异质性，同时检测2种或以上的肿瘤生物标志物被认为是肿瘤早期诊断的较好选择[1-2]。 　　热休克蛋白27（HSP27）是小分子热休克蛋白亚家族中重要的一员，参与了细胞的增殖、分化以及细胞凋亡的信号转导调节，与肿瘤关系密切，是一个涉及到细胞生长、细胞凋亡、肿瘤的发生和转移等功能的重要蛋白，在乳腺、肝、结肠、肺等多种肿瘤细胞中异常过表达，并与肿瘤的恶性程度有关[3]。磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（glypican-3，GPC3）在肝癌组织中高表达，而在非肝癌组织及正常组织中没有表达或表达量极低，其表达的阳性率高于AFP，其有可能成为用于诊断PHC的新的肿瘤标志物[4]。本实验通过免疫组织化学方法检测肝癌、肝硬化、肝炎、良性肝脏占位组织中的HSP27与GPC3的表达情况，探讨这二者在肝癌中的诊断价值及其临床意义。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　32例肝癌组织、30例肝硬化组织、25例良性肝脏占位组织（14例肝囊肿、11例肝血管瘤组织）取自重庆市巴南区人民医院（以下简称“我院”）肝胆外科，慢性肝炎的31例组织标本取自我院消化内科及感染科。其中肝癌组织为术前未经放疗、化疗的原发性肝癌患者的手术切除标本，均取无坏死癌组织和无癌细胞浸润的癌旁组织。30例肝硬化组织中男20例，女10例，年龄36～48岁。32例肝癌患者中男22例，女10例，年龄39～83岁（≤50岁者12例，50岁者20例）。血清HBsAg阳性者18例，阴性者14例；AFP≤400 μg/L者18例，400 μg/L者14例；瘤体直径≤5 cm者14例，5 cm者18例；肿瘤组织Edmondson-Steiner分级：Ⅰ级6例，Ⅱ级14例，Ⅲ级2例，Ⅳ级10例；肝癌TNM分期Ⅰ期16例，Ⅱ期2例，Ⅲ期12例，Ⅳ期2例。研究对象年龄、性别等一般资料差异无统计学意义（P 0.05），具有可比性。 　　1.2 试剂与方法 　　HSP27-抗（鼠抗人heat shock protein 27单克隆抗体），GPC3-抗（鼠抗人Glypican 3单克隆抗体）均购自福州迈新生物技术开发有限公司，ChemMateTM EnVision/HRP兔/鼠通用型二抗购自基因科技（上海有限公司），10 mmol/L磷酸盐缓冲液（PBS）、苏木精。操作按说明书进行。 　　1.3 结果判定 　　每张切片在400倍显微镜下随机取5个视野，每视野计数100个癌细胞为基数，按阳性细胞所占比例的平均数为评定阳性的依据。分为阴性（-），细胞无染色或阳性细胞 50%。 　　1.4 统计学方法 　　采用统计软件SPSS 17.0对实验数据进行分析，计数资料以率表示，采用χ2检验。以P 0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 HSP27在肝癌、肝硬化、肝炎、良性肝脏占位组织中的表达 　　Hsp27主要表达在细胞质，少数可见胞膜表达，呈棕黄色。