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第三章 生物信息的传递(上) ——从DNA到RNA ● 基本概念 ● 转录起始: RNA聚合酶、启动子 ● 转录的基本过程 ● 转录后加工 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● RNA合成与DNA合成异同点 RNA的分类 DNA是遗传信息的载体,遗传信息的作用通常由蛋白质的功能来实现,但DNA并非蛋白质合成的直接模板,合成蛋白质的模板是RNA。正常细胞遗传信息的流向是: RNA包括hnRNA(不均一核RNA,heterogeneous nuclear RNA) 、 mRNA、 rRNA、tRNA、snRNA(小核RNA,small nuclear RNA)和scRNA(小胞浆RNA,small cytosol RNA) ,它们均与遗传信息的表达有关。 mRNA是遗传信息的携带者,其核苷酸序列决定着合成蛋白质的氨基酸序列;hnRNA是mRNA的前体,含有转录的、但不出现于成熟mRNA中的核苷酸片段(内含子); tRNA识别密码子,将正确的氨基酸转运至蛋白质合成位点; rRNA是蛋白质合成机器——核蛋白体的组成成分;snRNA在hnRNA向mRNA转变过程的剪接中起十分重要的作用。 一、基本概念 生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 ● 基因表达的第一步 ● 以D. S. DNA中的一条单链作为转录的模板 ● 在依赖DNA的RNA聚合酶的作用下 ● 按A U,C G 配对的原则,合成RNA分子. ● 模板单链 DNA的极性方向为3’ → 5’, 而非模板单链 DNA的极性方向与RNA链相同,均为5’ → 3’. 参与转录的物质 原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 模板:DNA 酶: RNA聚合酶 其他蛋白质因子 转录的不对称性: 在RNA的合成中,DNA的二条链中仅有一条链可作为转录的模板,称为转录的不对称性。 ● 基本概念 ● 转录起始:RNA聚合酶、启动子 ● 转录的基本过程 ● 转录后加工 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● RNA合成与DNA合成异同点 二、参与转录起始的关键酶与元件 (一) RNA聚合酶 大肠杆菌RNA聚合酶的组成分析 RNA聚合酶与DNA聚合酶的区别 (二) 启动子(promoter) ● 基本概念 ● 转录起始: RNA聚合酶、启动子 ● 转录的基本过程 ● 转录后加工 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● RNA合成与DNA合成异同点 三、转录的基本过程 1、起始位点的识别:RNA聚合酶与启动子DNA双链相互作用并与之相结合的过程。 2、转录起始:RNA链上第一个核甘酸键的产生 3、RNA链的延伸● ?亚基脱落,RNA–pol聚合酶核心酶变构,与模板结合松弛,沿着DNA模板前移;●在核心酶作用下,NTP不断聚合,RNA链不断延长。 4、转录终止 不依赖?因子的终止 终止位点上游一般存在一个富含GC碱基的二重对称区,RNA形成发夹结构; 终止效率与二重对称序列和寡聚U的长短有关,长度增加,效率增加 。B:发夹的形成破坏了一部分RNA-DNA杂交链,仅留下多聚U与多聚A的一段杂交链。C:多聚U与多聚A杂交物解离,转录本被释放。 依赖?因子的终止 真核生物RNA的合成 1、核心启动子 (core promoter) ●定义:指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列,包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区TATA 常在-25bp左右,相当于原核的-10序列T85A97T93A85A63A83A50●作用:选择正确的转录起始位点,保证精确起始2、上游启动子元件(upstream promoter element,UPE)●包括CAAT盒(CCAAT)和GC盒(GGGCGG)等。 CAAT:-70 - -80bp GGGCGG:-80 - -110bp●作用:控制转录起始频率。 转录因子 转录复合体 TBP TAFs TFIIA TFIIB TFIIF Pol II TFIIE RNA pol Ⅱ的转录起始 真核生物RNA聚合酶Ⅱ转录过程所需的蛋白质因子 TBP:专门识别TATA盒 TFⅡA:稳定TBP、 TFⅡB对启动子的结合 TFⅡB:结合与TBP,组装pol- TFⅡF复合物 RNA聚合酶Ⅱ:催化RNA合成,12亚基。 TFⅡF:结合RNApolⅡ- TFⅡB,防止RNApolⅡ结合于 非特异DNA顺序 TF
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