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植物的克隆 3.植物细胞全能性表达的条件 离体状态(必要),无菌; 有一定的营养物质; 植物生长调节剂; 一定的外界环境条件(温度,光照) 植物组织培养的培养基 无机营养成分:C,H,O大量元素及部分微量元素 有机营养成分 ① 含N物质:包括维生素和氨基酸 ② 碳源:2%—5%的蔗糖 ③ 琼脂:起支持作用 ④ 相关激素:生长素,细胞分裂素和赤霉素 PH值:5.0-6.0 植物细胞杂交 人工种子 用人工种皮包被体细胞胚,可以制造人工种子 解决有些植物结子困难、发芽率低、繁殖困难等问题 可以很方便的储藏和运输 植物细胞培养的4种技术 组织培养:脱分化成愈伤组织(簿壁细胞),再分化为植株 悬浮细胞培养:愈伤组织在摇床上分散成单个细胞,再发育成胚状体,形成植株 原生质体培养:纤维素酶和果胶酶脱壁,获得原生质体。转基因受体、细胞融合、利用全能性诱导为完整植株 单倍体培养:花药离体培养 ⑴定义: 用两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞,且把杂种细胞培育成新的植物体的方法。 ⑵优势: 打破了不同种生物间的生殖隔离限制。即克服远缘杂交不亲和障碍!大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围 植物体细胞杂交 酶解法 (纤维素酶、果胶酶) 意义:克服远缘杂交不亲和的障碍,培育出作物新品种。 杂种细胞形成的标志 植物组织培养 融合方法? 植物A细胞 植物B细胞 去壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 融合体 再生壁 杂种细胞 细胞分裂 愈伤组织 杂种植株 去壁的常用方法: 酶解法(纤维素酶、果胶酶等) 原生质体融合方法: 物理法:离心、振动、电刺激等 化学法:聚乙二醇(PEG) 植物体细胞杂交过程示意图 细胞融合的基础: 细胞膜的流动性 植物细胞工程:培养植物细胞(包括原生质体),借助基因工程方法,将外源遗传物质导入受体细胞(包括原生质体受体)中,或通过细胞融合,显微注射等将不同来源的遗传物质重新组合,再通过对这些转基因细胞或重组细胞进行培养,获得具有特定性状的新植株 多途径的植物克隆实践:p24--25 植物组织培养的应用: (1)试管苗的快速繁殖 (2)无病毒植物的培育 (3)生产药物 (4)人工种子 (5)转基因植物的培育 作物脱毒的原因: 长期进行无性繁殖的作物,易积累感染的病毒,导致产量降低,品质变差,而植物的分生区一般不会感染病毒,用分生区的细胞进行组织培养,就能得到大量的脱毒苗。 马铃薯是无性繁殖的作物,体内容易积累病毒,会导致其品质变差。目前对它进行脱毒处理最好的办法是 A.采用茎尖组织培养技术获得植株 B.采用基因工程技术培育抗虫植株 C.采用诱变育种培育抗性植物 D.采用杂交育种培育抗性植物 课堂反馈 现在已有胡萝卜、芹菜、柑橘、咖啡、棉花、玉米、水稻、橡胶等几十种植物的人工种子试种成功,但由于成本较高,中国尚未应用于生产。 * * 蝴蝶兰属热带气生兰,花形似蝴蝶,因而得名。其花形态美丽,色彩丰富,花期长,在热带兰中有“兰花皇后”之美称,是近年来最受欢迎的洋兰之一。蝴蝶兰是单茎性气生兰,植株极少发育侧芽,且种子极难萌发,对其进行常规性的繁殖,增殖速度很慢。你能想办法快速大量繁殖它吗? 思考: 粮食危机是全球五大危机之一,土地面积减少,粮食产量降低,威胁着人类的生存,你能想办法在现有土地上增产粮食吗? 植物克隆的技术基础:植物组织培养 1958年,斯图尔德(美)胡萝卜组织培养 为什么胡萝卜根的培养细胞能培养成一个完整的胡萝卜植株呢? 植物组织培养的理论基础(原理): 细胞的全能性 一、植物细胞的全能性 1.植物细胞全能性:植物体的每个生活细胞都具有遗传上的全能性,因而具有发育成完整植株的潜能。 2.原理:生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因。 在生物体内为什么细胞没有表现出全能性,而是分化为不同的组织或器官呢? 基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果. 生物体的绝大多数活细胞含有该生物全部的遗传信息,具有遗传上的全能性,因而都具有发育成完整生物体的潜能。植物细胞和动物的受精卵等细胞能较强地表现这种全能性,而一般情况下高等动物细胞的全能性无法表现 4.全能性的体现 所有的植物生活细胞(即使是已经高度分化的细胞)都具有全能性,通过植物组织培养就可体现全能性 不同种类植物和同种植物的不同基因型个体之间遗传性的差异,全能性的表达程度大不相同 细胞全能性的比较: 受精卵生殖细胞(卵细胞或花药)干细胞体细胞 植物细胞动物细胞 分化程度低的细胞分化程度高的细胞 ①、配置(半固体)培养基 ②、获取(消毒的)植物组织 ③、组织培养,获得愈伤组织
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