第八章病原微生物感染的检查方法课件.pptVIP

第八章　病原微生物感染的检查方法 第一节　细菌感染的检查 一、病原体检查： （一）标本采集及送检原则 1、根据疾病种类和病程不同，采集不同标本 2、早采集： 　◆ 疾病早期，如甲肝 　◆ 使用抗菌药物之前 　◆ 机体免疫因素形成之前 　◆ 未出现合并或继发感染之前 3、注意无菌采集，避免人为污染。 4、标本的量要够，质要鲜 5、快接种（床旁）或保温送检。 　 标本采集的准确性是关系检查结果的可靠性。 （二）病原菌的检查程序 1、直接镜检 显微镜放大 （1）不染色标本的检查 ◆ 主要用于观察病原菌的某些形态特点及运动性 ◆ 常用的方法有压滴法和悬滴法。 （2）染色标本的检查 单染色：只用一种染料进行染色 　　　　可分正染和负染 　　　　用于观察形态，不能鉴别染色性。 复染色：用两种或两种以上染料进行染色 　　　　常用的有革兰染色、抗酸染色、荧光染色 　　　　既可观察形态、结构，又可鉴别染色性。 2、分离培养 ◆ 培养特性：培养基种类、温度、pH、生长时间、附加条件 ◆ 菌落形态特征：大小、表面、透明度、边缘、高度、色素、溶血、气味 3、病原菌鉴定 （1）生化反应鉴定 ◆ 分解产物鉴定（生化反应试验） ◆ 合成产物鉴定（酶和毒素测定） 二、免疫学检查 　（一）抗原检查 　（二）抗体检查 三、分子生物学检查 　（一）核酸杂交 　（二）聚合酶链式反应（PCR） 四、药敏试验 　（一）纸片琼脂扩散法 　（二）连续稀释法 （三）核酸指纹图谱技术 是一种限制性核酸内切酶，酶切位点排列序列分析，主要用于菌种或菌株的鉴定。 （四）细菌质粒图谱的测定　可对细菌型别鉴定常用作流行病学调查。 五、其他检查 （一）气相色谱法 （二）酶的检查 * * 检查方法包括 病原微生物的分离 培养和鉴定 免疫学检查 分子生物学检查 病原体检查 抗原、抗体检查 核酸检查 革兰染色法： 　◆　制片：涂片——干燥——固定 　◆　染色： 结晶紫初染1分钟 水冲洗 碘液媒染1分钟 95%乙醇脱色30秒左右 稀释复红复染30秒 干后，油镜下观察结果 水冲洗 水冲洗 水冲洗 结果 染成紫色　称革兰染色阳性 G＋菌 染成红色　称革兰染色阴性 G－菌 意义 鉴别细菌 指导用药 了解致病性 原理 三个学说 等电点学说 化学学说 通透性学说 内毒素测定 体内法——动物致热作用 体外法——鲎试验 外毒素测定 体内法——小白鼠毒力试验 体外法——ELeK平板毒力试验 （2）血清学鉴定 （3）噬菌体鉴定