《微生物检验菌种保存与管理》.docVIP

第十六章　菌种保存与管理本章考点： 　　1.菌种保存方法 　　2.菌种保管 菌种保管简述、注意事项一、保存菌种的方法保存方法 适用对象 保存条件和时间 培养基保存法（最常用而又简易的保存方法） 普通琼脂斜面保存法 一般细菌 4℃冰箱中，一般可保存一个月，每月传代一次 血液琼脂斜面保存法 链球菌、肺炎链球菌 4℃冰箱中保存，链球菌须半个月至1个月移种一次，肺炎链球菌的新分离菌株须2～4天移种一次，以后逐渐延长移种时间，在适应后可延至半个月移种一次 巧克力色斜面保存法 脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌 35℃孵箱中保存，一般每2天移种一次。 鸡蛋斜面保存法 含有Vi抗原的沙门菌属及其他含表面抗原的细菌 一般4℃冰箱中可保存一个月。 半固体穿刺保存法 大多数普通细菌 4℃冰箱保存。保存时间可达3～6个月 干燥保存法 一般细菌 干燥后低温保存，可保存数年至十几年 冷冻干燥保存法（目前最有效的菌种保存方法之一） 一般细菌 冷冻真空干燥，保存期一般3～5年，有的可长达10年以上 液氮超低温保存法（目前保存菌种最理想的方法） 一般细菌 其他方法难以保存二、菌种保管　　1.应充分了解每种细菌的不同生物性状及营养要求，以选择适宜的培养基。一般原则是使细菌能够生长而不易变异的前提下，必须选择营养丰富的培养基，一般不用含糖的培养基。液体培养基不适于保存菌种。　　2.培养后最好在细菌尚未旺盛发育之前取出，放冰箱内保存。　　但应注意，一般细菌大多保存于4℃冰箱中，但真菌，霍乱弧菌、铜绿假单胞菌及粪产碱杆菌需在室温保存。而脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌及初次分离的流感嗜血杆菌需保存于37℃孵箱中。　　3.保存菌种应做鉴定记录。在主要培养基上生长情况、菌落特征、形态及革兰染色或特殊染色反应、生化反应、血清学性状以及个别菌种需要的动物试验结果等。　　4.保存的菌种应有两套，一套供保存传代用，一套供实验用。　　5.定期转种，每转种三代作一次鉴定。　　6.专人保管和发放，严格保管和发放制度。　　本章练习题：　　目前最有效的菌种保存方法是　　A.巧克力斜面保存法　　B.鸡蛋斜面保存法　　C.半固体穿刺保存法　　D.干燥保存法　　E.冷冻真空干燥法 　　[答疑编号0101]　　『正确答案』E将细菌接种于琼脂半固体培养基内，置4℃冰箱保存。保存时间可达几个月　　A.1～3个月　　B.2～4个月　　C.3～6个月　　D.1个月　　E.3个月 　　[答疑编号0102]　　『正确答案』C关于菌种保管正确的是　　A.应充分了解每种细菌的不同生物性状及营养要求，以选择适宜的培养基　　B.培养后最好在细菌尚未旺盛发育之前取出，放冰箱内保存　　C.保存菌种应做鉴定记录　　D.定期转种，每转种三代作一次鉴定　　E.专人保管和发放，严格保管和发放制度 　　[答疑编号0103]　　『正确答案』ABCDE第十七章　细菌检验的商品化、自动化设备本章考点：　　（1）微量生化反应系统　　（2）自动化装置第一节　微量生化反应系统一、常用的微量生化反应系统　　根据细菌的不同生物学性状及其代谢产物的差异，可采用多种生化反应系统鉴定细菌，现已有商品化的成套产品，它多由10～24项生化指标组合而成，通过对结果的判定，得出一个3～7位的数据，查阅编码手册即可获得相应的细菌名称。常用的微量生化反应系统有以下几种：　　（一）Micro-ID系统　　本系统主要用于肠杆菌科的细菌鉴定。它是一块带有15个反应池的塑料板，每个反应池含有一种生化反应培养基及试剂。　　（二）API系统（目前较常用的微量生化鉴定系统）　　API系统为一块塑料板，上有20个小杯，每个小杯装有不同的生化反应培养基和指示剂。 API系统 鉴定范围 API-20E 肠杆菌科细菌 API-20NE 非肠杆菌科细菌 API Staph 葡萄球菌属和微球菌属细菌 API Strep 链球菌属细菌 API Coryne 棒状杆菌属细菌 API 50CHB 芽胞杆菌属等革兰阳性杆菌 API NH 奈瑟菌属、布兰汉菌属和嗜血杆菌属细菌 API Canpy 弯曲菌和螺杆菌 API-20A 厌氧菌 　　（三）Minitek系统　　该系统为带有l2个凹孔的塑料盘。包括34种生化反应培养基及指示剂的滤纸片。　　（四）肠杆菌-MBl2E系统　　该系统为一块96个凹孔的塑料板，分8排。可同时鉴定8份标本。每孔含有一种干燥生化培养基，可提供12项生化反应。　　（五）氧化发酵鉴定系统　　该系统主要有氧化发酵管可应用于非发酵菌，也可用于气单胞菌等一部分发酵型细菌的鉴定。二、自动化装置　　（一）半自动微生物鉴定和药敏系统　　1.VITEK—ATB （Automicr