《微生物检验外界因素对细菌的影响》.docVIP

第五章　外界因素对细菌的影响本章考点：　　1.基本概念　　（1）消毒、灭菌、防腐、无菌、无菌操作　　2.物理因素对细菌的影响　　（1）高温（湿热、干热）　　（2）日光和紫外线　　（3）电离辐射　　（4）超声波　　（5）滤过除菌　　（6）干燥　　3.化学因素对细菌的影响　　（1）常用消毒剂的杀菌机制　　（2）常用消毒剂的种类　　4.影响消毒灭菌效果的因素及监测　　（1）影响因素　　（2）效果监测　　5.生物因素对细菌的影响　　（1）种类基本概念：　　1.消毒：消除或杀灭外环境中的病原微生物及其他有害微生物的过程称为消毒。用于消毒的化学药物称为消毒剂。　　2.灭菌：用物理或化学方法消除或杀灭物体上所有微生物（包括病原微生物、非病原微生物、细菌的繁殖体和芽胞）的方法。灭菌的要求是把微生物存活的概率减少到最低限度。　　3.防腐：防止和抑制细菌生长繁殖的方法。用于防腐的化学药物称为防腐剂。　　4.无菌：指物体上不含活菌。　　5.无菌操作：防止微生物进入机体或其他物品的操作技术称无菌操作。　　注：相似概念的区分，关键词的把握。　　一、物理因素对细菌的影响　　（一）温度　　各种细菌都需在最适生长温度的范围内生长。当外界温度明显高于最适生长温度，细菌被杀死；如果在低于细菌的最低生长温度时，细菌代谢活动受抑制，则出现抑菌作用。　　1.高温：细菌蛋白质、核酸、细胞壁和细胞膜及酶类因热力作用发生变性或凝固，活性消失，代谢发生障碍导致细菌死亡。大多数无芽胞细菌55℃～60℃加热30～60min即被杀死；加热100℃立即死亡，有芽胞的破伤风芽胞梭菌需煮沸3h才被杀死。热力灭菌分湿热和干热两种。在同一温度下，前者的效力大于后者。　　（1）湿热：常用的方法有 方法 应用 巴氏消毒法 61.1℃～62.8℃30min或 71.7℃l5～30s。 目前主要用于牛乳消毒 煮沸法 煮沸l00℃（1个大气压状态下），5min中可杀死细菌繁殖体，如于水中加入2%碳酸钠，则可提高其沸点至105℃，可杀死芽胞。 可杀死繁殖体和芽胞 流通蒸气灭菌法 利用一个大气压下l00℃水蒸气进行消毒。 经10～30min细菌繁殖体被杀死，但对芽胞的作用不大。 间歇灭菌法 间隔加热培养，使残存的芽胞发育成繁殖体，然后加热使之被杀死。 可达到杀死芽胞又使不耐100℃的物质保存下来。 高压蒸汽灭菌法 通常在103.4kPa的压力下达121.3℃，维持15～20min可杀灭所有细菌芽胞和繁殖体。 可杀灭所有细菌芽胞和繁殖体。本法适用于耐高温、耐湿物品的灭菌，如普通培养基、生理盐水、手术敷料等。 　　注：总结可杀死芽胞的方法有哪些？　　（2）干热　　1）烧灼：是常用的干热灭菌法。微生物实验室使用的接种环、接种针、瓶口和试管口常在火焰上烧灼灭菌。　　2）干烤：在密闭干烤箱内加温至160℃～170℃维持2h是对一般玻璃器皿、注射器、瓷器的灭菌方法，适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品。　　2.低温：一般细菌耐低温，在低温条件下，细菌代谢活动降低不再繁殖，能较长时间维持生命，故常用于保存菌种。为避免解冻时对细菌的损伤，可在低温状态下真空抽干，去尽水分，此法称冷冻真空干燥法，可保存细菌数年至数十年，是目前保存菌种的最好方法。　　（二）光线和射线　　随光线和射线的波长、强度、作用距离、持续时间而影响它们对细菌的作用。　　1.日光和紫外线：发挥杀菌作用的日光主要是紫外线，波长265～266nm时杀菌作用最强。　　紫外线杀菌机制：①紫外线使DNA分子形成胸腺嘧啶双聚体，干扰DNA正常复制，导致细菌死亡。②紫外线可使分子氧变成臭氧，后者具有杀菌能力。杀菌波长的紫外线对人体皮肤、眼角膜等均有损伤作用，使用时应注意防护。紫外线穿透能力差。　　应用：手术室、微生物学实验室或不耐热的物品表面等。　　2.电离辐射：微生物体中的水受电离照射后产生的自由基及自由基离子破坏微生物核酸、酶和蛋白质致微生物死亡，适用于不耐热物品的灭菌。如X线、γ射线、高速电子等。　　应用：不耐热的塑料制品。　　（三）超声与超声波　　不被人耳感受的高于20千赫兹／秒的声波称超声波。杀菌机制是超声波通过液体时发生的空腔化作用破坏了原生质的胶体状态，导致细菌死亡。　　应用：一般用于细胞的粉碎以提取细胞组分和抗原制备。　　（四）滤过除菌　　滤过是以物理阻留方法将液体或空气中的微生物除去。所用的器具为滤器。滤器中的微孔只允许液体或气体中小于滤孔孔径的物质通过。　　滤器的种类很多，目前常用的有薄膜滤器。用于除菌的滤膜孔径为0.22μm。另外以石棉板为滤板的金属滤器称Seitz滤器（蔡氏滤器），按其滤孔大小分成三种：K型滤孔最大，澄清用；EK-S滤