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食品检测3兽药

名词定义:兽药残留[Residues of Veterinary Drugs]:指食品动物用药后,动物产品的任何食用部分中与所有药物有关的物质的残留,包括原型药物或/和其代谢产物。总残留[Total Residue]:指对食品动物用药后,动物产品的任何食用部分中药物原型或/和其所有代谢产物的总和。日允许摄入量[ADI:Acceptable Daily Intake]:是指人一生中每日从食物或饮水中摄取某种物质而对健康没有明显危害的量,以人体重为基础计算,单位:g/kg体重/天。最高残留限量[MRL:Maximum Residue Limit]:对食品动物用药后产生的允许存在于食物表面或内部的该兽药残留的最高量/浓度(以鲜重计,表示为g/kg)。食品动物[Food-Producing Animal]:指各种供人食用或其产品供人食用的动物。鱼[Fish]:指众所周知的任一种水生冷血动物。包括鱼纲(Pisces),软骨鱼(Elasmobranchs)和圆口鱼(Cyclostomes),不包括水生哺乳动物,无脊椎动物和两栖动物。但应注意,此定义可适用于某些无脊椎动物,特别是头足动物(Cephalopods)。家禽[Poultry]:指包括鸡、火鸡、鸭、鹅、珍珠鸡和鸽在内的家养的禽。动物性食品[Animal Derived Food]:全部可食用的动物组织以及蛋和奶。可食组织[Edible Tissues]:全部可食用的动物组织,包括肌肉和脏器。皮+脂[Skin with fat]:是指带脂肪的可食皮肤。皮+肉[Muscle with skin]:一般是特指鱼的带皮肌肉组织。副产品[Byproducts]:除肌肉、脂肪以外的所有可食组织,包括肝、肾等。肌肉[Muscle]:仅指肌肉组织。蛋[Egg]:指家养母鸡的带壳蛋。奶[Milk]:指由正常乳房分泌而得,经一次或多次挤奶,既无加入也未经提取的奶。此术语也可用于处理过但未改变其组份的奶,或根据国家立法已将脂肪含量标准化处理过的奶。兽药残留检测仪l 抗生素类:氯霉素、氟喹诺酮、环丙沙星、恩诺沙星等2 激素类:盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、喹乙醇等3 动物疫病类:O 型口蹄疫抗体、猪瘟病毒抗体、禽流感病毒抗体等4 其他类:农药残留、三聚氰胺、安定、孔雀石绿等1.3检测原理(竞争法) 1.3.1 抗原抗体的基本结构 1.3.2检测的基础是基于抗原抗体的胶体特性与极性基的吸附作用。抗体的蛋白质(免疫球蛋白),大多数抗原也是蛋白质,在水溶液中都具胶体特性,并带电荷,形成相对稳定的亲水胶体。同时抗原、抗体含有羧基、氨基及肽链等极性基团,当两者由于理化特性相吻合互相吸引而结合后,成为憎水胶体系统。抗原和抗体的相互吸引和结合是依靠下列各种分子间引力所促成: 库仑吸引力/静引力,抗原和抗体分子相反电荷的氨基和羧基之间相互吸引而促成; 范德华引力,由于抗原和抗体分子的外层电子之间相互作用的扰动产生一种引力,引起分子吸引而发生结合,这种作用取决于分子的空间构型;氢键结合作用,具-OH、-NH2、-COOH等亲水基团的抗体和相应的抗原接近时,可形成相对微弱和可逆的氢键桥梁,使得抗原抗体结合;疏水作用,抗原抗体分子侧链上的某些氨基酸(如亮氨酸、颉氨酸及苯丙氨酸等)为疏水基团,当抗原抗体分子表面上的这些疏水基团密切接触时可排除水分子,在两者之间产生相互吸引力而发生结合。 1.3.3 抗原抗体的结合具有:特异性:取决于抗原决定簇的数量、性质和立体构型;抗体Fab段的高变区和相应抗原决定簇的结合能力. 所以抗原抗体的种类质量直接影响结果 可逆行: 结合仅是分子表面的结合,而非共价键的结合,具有相对稳定性但为可逆反应.一定条件下(低PH、冬融、高浓度盐等) 所以缓冲液很重要 最适比例性:两者量需具一定的量比关系才发生最强的结合反应。所以抗原抗体的数量也是重要因素 反应具阶段性:受环境中电解质、温度、PH、等因素的影响。所以在ELISA实验时各种步骤一定要准确到位。 1.3.4以氯霉素为例: 酶标板包被针对兔IgG(氯霉素抗体)的羊抗体。加入氯霉素抗体,氯霉素酶标记物,氯霉素标准液或样品溶液。游离氯霉素与氯霉素酶标记物竞争氯霉素抗体结合位点,同时氯霉素抗体也与固定的羊抗体结合。没有结合的氯霉素酶标记物在洗涤步骤中被除去。将酶基质和发色剂加到板孔中并孵育。结合的氯霉素酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色产物。加终止液后使颜色由蓝变黄。用450nm判读,吸光度值与样品中氯霉素含量成反比。 大多数试剂盒包被的是二抗。 RONDOX的试剂盒是直接将氯霉素特异性抗体预包被酶标板上,当在酶标孔中加入样品和酶标记氯霉素后,样品中的氯霉素和酶标记氯霉素竞争抗体结合位点,洗涤后底物显色,加酸终止之后,颜色由蓝变黄。用450nm判读,颜色

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