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第九章 革兰氏阴性兼性厌氧杆菌 第一节 肠杆菌科概述 肠杆菌科(Enterobacteriaceae)为一大群革兰氏阴性杆菌。根据生化反应、血清学试验、DNA同源性研究,本科至少包括28个菌属,110个以上的菌种。 本科细菌广泛分布于自然界,包括腐生菌、寄生菌和人及动物的病原菌。多数是人和动物肠道正常菌群的重要成员,只有少数生活在植物及水和土壤中。沙门氏菌属、志贺氏菌属以及埃希氏菌属和耶尔森氏菌属的部分成员对人或动物具有广泛的致病性,在公共卫生和兽医临诊上都有重要意义。 第二节 埃希氏菌属(Escherichia) 本属中最重要的菌种是大肠埃希氏菌(Escherichia coli),俗称大肠杆菌,为德国科学家Escherich首先发现(1885年)。 长期以来,一直认为大肠埃希氏菌是人和动物肠道内正常菌群的重要成员之一,维持着肠道的正常生理功能。但后来的许多研究,发现一些特定血清型可致畜禽的疾病,给畜牧业造成危害。 对大肠杆菌的正确认识:是人和动物肠道正常菌群成员之一;某些血清型可引起畜禽的疾病;在环境卫生和食品卫生学上,常被用作粪便直接或间接污染的检测指标;本菌还是分子生物学和基因工程中重要的实验材料和研究对象。 一、形态及染色特性 1.G-直杆菌,大小0.4-0.7×1-3μm,两端钝圆,散在或成对,无芽胞。 2.大多数菌株具有鞭毛,但也有无鞭毛或丢失鞭毛的变异株。 3.多数菌株有菌毛,少数菌株兼有性菌毛,菌毛与毒力相关! 4.除少数菌株外,通常无可见荚膜,但常有微荚膜 二、培养及生化特性 1、培养特性 ① 兼性厌氧; ② 最适生长温度37℃,最适生长pH7.2-7.6; ③ 普通琼脂:生长良好,圆形凸起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落,直径约2~3mm; ④ 肉汤培养:均匀浑浊,管底有粘性沉淀,液面管壁有菌环. ⑤ 麦康凯琼脂:红色菌落;伊红美蓝琼脂:黑色带金属闪光的菌落;SS琼脂:一般不生长或生长较差,生长者呈红色。 ⑥ 血平板:一些致病性菌株常β溶血; 2、生化特性 ① 能发酵多种糖类,产酸产气。多数菌株发酵乳糖;约半数菌株不分解蔗糖; ② IMViC:++―― ③ 几乎均不产生硫化氢,不分解尿素; ④ 其余生化反应见课本。 三、抗原及血清型 1. 大肠杆菌抗原主要有O、K和H三种 (1)O抗原:即菌体抗原,化学本质——多糖-磷脂-蛋白质复合物。耐热——121℃ 2h不破坏其抗原性。每个菌株只含有一种O抗原,其种类以阿拉伯数字表示;可用抗O单因子血清通过凝集试验鉴定。 (2)K抗原:即荚膜抗原;个别位于菌毛中。不耐热。 O不凝集性:具有K抗原的菌株不会被其相应的抗O血清凝集。 (3)H抗原: 即鞭毛抗原;不耐热,80℃可破坏其抗原性。1个菌株仅有1种H抗原。 2、血清型:可用O:K:H排列表示其血清型。如:O8:K23:H19,表示该菌具有O抗原8,K抗原23,H抗原为19。 致人畜腹泻的产肠毒素大肠杆菌,除含K抗原外,还可含有蛋白质性粘附素抗原。对粘附素抗原应并列写于多糖K抗原之后。 如:O8:K87,K88:H19 中 K88即为粘附素抗原。 四、致病性 1.多数是条件致病菌,只在特定条件下致病,如:侵入肠外组织或器官。 2.少数特定的血清型是病原性大肠杆菌,正常情况下极少存在于健康机体内。 3.据毒力因子与发病机制,致病性大肠杆菌分为: (1)产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic E.coli,ETEC) (2)产志贺毒素大肠杆菌(shiga toxin-producing E.coli,STEC)(3)肠致病性大肠杆菌(enteropathogenic E.coli,EPEC) (4)肠侵袭性大肠杆菌(enteroinvasive E.coli, EIEC) (5)肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic E.coli, EHEC) (6)肠粘附性大肠杆菌(enteroadherent E.coli, EAEC) 其中研究的最清楚的是前二类 (一)产肠毒素大肠杆菌(ETEC) ETEC是致人和幼畜腹泻最常见的病原菌;毒力因子有粘附素性菌毛和肠毒素,二者密切相关且缺一不可,否则不引起腹泻或只致轻度腹泻。 1、粘附素性菌毛 (1)是一类特有菌毛,能粘附于宿主小肠上皮细胞;对其抗原亦相应称作粘附素菌毛抗原 (2)动物ETEC的粘附素主要有K88、K99、987P和F41,其他:F18ac、F42、F17、F165等。 粘附素不是腹泻的直接致病因子,但它是感染的首要毒力因子; ETEC首先粘附于宿主小肠上皮细胞;在肠内定居和繁殖,从而增强细菌的致病性。 2、肠毒素(enter
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