生科系生化实验2013本教学大纲.docVIP

生物化学实验课程教学大纲 实验名称：生物化学实验 学 时：28 学 分：2 适用专业：生物技术与技术系 执 笔 人：廖贵芹 审 订 人：张军林 实验的目的与任务 通过本课程的学习,加深对生物化学基础理论,基本知识的理解,正确和较熟练地掌握比色,层析,电泳,离心等生物化学基本实验方法的原理和操作技能,提高观察,分析和解决问题的能力,培养学生严谨的工作作风和实事求是的科学态度,为学习专业课程和未来的科学研究及实际工作打下良好的基础。 教学基本要求 1、要求明确实验目的，弄懂实验原理，学会实验方法，掌握实验技能。 2、要求学生在教师的指导下，亲自动手，独立或者合作完成实验操作过程，如实记录实验结果，书写实验报告，培养学生的独立工作和分析问题的能力。 3、要求学生严格遵守实验室规则，养成良好的实验习惯。 √ √ √ 14 酪蛋白的提取 2 √ √ 15 操作考试 2 16 理论考试 2 四、实验教学内容及学时分配 实验一基本要求及重要仪器的使用(2学时) 1.目的要求 ①明确实验室的规章制度 ② 重要仪器的使用 2. 方法原理: 实验室的规章制度:分光光度计技术；电泳技术；离心技术 3.主要实验仪器 ①722S型分光光度计 ②电泳仪电泳槽 ③离心机 ④微量滴定管 4.掌握要点 掌握2中4中重要仪器的使用步骤 5.实验内容 老师先演示然后学生操作 实验二 柑橘皮果胶的提取 (2学时) 1.目的要求 ①了解果胶提取的原理和流程 ②掌握循环水真空泵的使用方法 2.方法原理 先将原果胶变成水溶性果胶，然后根据果胶不溶于乙醇的原理将其沉淀得到果胶。 3.主要实验仪器及材料 ①仪器：恒温水浴箱、循环水真空泵、布氏漏斗、电炉、烧杯、玻棒、天平。 ②试剂：0.2mol/L盐酸、95%乙醇、酒石酸、新鲜柑橘皮。 4.掌握要点 ①果胶的生化特性和生产应用 ②果胶的提取原理和流程 ③实验试剂的使用目的 ④循环水真空泵的使用方法 5.实验内容 原料选择→原料处理→抽提→过滤、浓缩 实验三 蛋白质的等电点测定和沉淀反应(2学时) 1.目的要求 ①了解蛋白质的两性性质 ②学习蛋白质等电点测定的方法 ③了解蛋白质变性与沉淀的关系 2.方法原理 蛋白质是两性电解质，在不同PH值溶液中溶解度不同，PH值等于等电点的溶液是蛋白质沉淀。无机盐、金属离子、有机酸和醇类试剂能是蛋白质改变理化性质而沉淀。 3.主要实验仪器及材料 试剂：0.4%酪蛋白醋酸钠溶液、1.00mol/L醋酸溶液、0.10mol/L醋酸溶液、0.01mol/L醋酸溶液、1:10鸡蛋溶液、3%硝酸银溶液、5%三氯乙酸溶液、饱和硫酸铵溶液、甲基红溶液、95%乙醇溶液 器材：恒温水浴锅、吸管、试管、试管架 4.掌握要点 蛋白质的两性解离性质。 测定蛋白质等电点的方法。 蛋白质变性与沉淀的关系。 5.实验内容 蛋白质的盐析。 重金属盐沉淀蛋白质。 生物碱沉淀蛋白质。 加热沉淀蛋白质。 乙醇沉淀蛋白质。 实验四 3，5-二硝基水杨酸法测定还原糖(2学时) 1.目的要求 掌握还原糖定量测定的原理和方法 2.方法原理 还原糖在碱性条件下加热氧化成糖酸及其他产物，3，5-二硝基水杨酸则被还原成棕红色物质，颜色深浅与还原糖浓度成正比关系，利用分光光度计测定吸光值查对标准曲线并计算课求出样品的还原糖含量。 3.主要实验仪器及材料 仪器：恒温水浴箱、PH试纸。 试剂：碘化钾-碘溶液、3，5-二硝基水杨酸、标准葡萄糖溶液。 4.掌握要点 分光光度计的使用原理和使用方法 标准曲线的应用和空白对照的意义、绘制标准曲线的方法 还原糖和总糖的概念 5.实验内容 葡萄糖标准曲线的绘制 还原糖的测定 实验五 酵母RNA的分离及组分鉴定(2学时) 1.目的要求 了解RNA的组分；掌握鉴定RNA组分的方法 2.方法原理 在酵母的碱性提取液中加入酸性乙醇溶液是解聚的核糖核酸沉淀，利用离心技术收集RNA粗提物后用硫酸水解RNA得核糖、磷酸和碱基组分，分别用定糖法、定磷法和嘌呤银反应鉴定。 3.主要实验仪器及材料 试剂：0.04mol/L氢氧化钠溶液、酸性乙醇溶液、95%乙醇、浓硫酸、浓氨水、0.1mol/L硝酸银溶液、三氯化铁浓盐酸溶液、苔黑酚乙醇溶液、钼酸铵溶液、抗坏血酸 器材：离心机、托盘天平、恒温水浴锅、锥形瓶、试管、试管架 4.掌握要点 RNA的组分和鉴定方法 实验中各试剂的用处 离心机的使用方法 5.实验内容 酵母的碱裂解、裂解液的醇析、RNA粗制品的酸水解、RNA组分的鉴定 实验六 卵磷脂的提取(2学时) 1.目的要求 掌握卵磷脂的提取及鉴定的原理和方法 2.方法原理 卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于